参归仁合剂对产后抑郁模型大鼠ERα、ERβ、RSK1影响的研究.pdf

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1、ChengduUniversityofTradionalChineseMedicine（临床医学院）二〇一八届硕士研究生学位论文参归仁合剂对产后抑郁模型大鼠ERα、ERβ、RSK1影响的研究EffectofShenguiRenmixtureonexpressionofERα,ERβandRSK1inPostpartumDepressionModelRats研究生姓名：李春雨指导老师：谢萍教授学科专业：中医妇科学二〇一八年五月学位论文参归仁合剂对产后抑郁模型大鼠ERα、ERβ、RSK1影响的研究EffectofShenguiRenmixt

2、ureonexpressionofERα,ERβandRSK1inPostpartumDepressionModelRats李春雨指导教师姓名：谢萍教授申请学位级别：硕士专业名称：中医妇科学论文提交时间：2018年5月论文答辩时间：2018年5月成都中医药大学二〇一八届硕士研究生学位论文中文摘要目的：本研究以产后抑郁(postpartumdepression，PPD)模型大鼠为对象，采用具有补虚化瘀作用的参归仁合剂进行干预。通过观察PPD模型大鼠行为学，血清雌二醇(E2)水平，以及检测下丘脑雌激素受体(ERα、ERβ)mRNA，下丘脑、

3、海马、额叶p90核糖体S6激酶(RSK1)蛋白的表达，探讨ERα、ERβ、RSK1与PPD的相关性，进而阐释参归仁合剂治疗PPD的作用机理。方法：1.将SD大鼠进行旷场实验(Openfieldtest，OFT)筛选合格动物，随机分为2组：对照组（Ctl组）和模型组（PPD组）。其中Ctl组不予任何处理，PPD组经卵巢切除手术(OVX)后连续激素注射模拟大鼠“妊娠”，23d后突然撤退激素制备PPD模型大鼠。2.造模后，Ctl组和PPD组皆进行糖水偏好测试(SPT)、OFT和强迫游泳实验(FST)，进行模型评价。并根据OFT总得分将PPD组

4、随机分为6组：模型组（Mdl组）、参归仁合剂高剂量组（S-H组）、参归仁合剂中剂量组（S-M组）、参归仁合剂低剂量组（S-L组）、苯甲酸雌二醇组（EB组）、盐酸舍曲林组（Ser组）。3.药物干预4周，并在给药2周后与给药4周后再次进行行为学测试：SPT、OFT和FST。4.药物干预4周的动物行为学测试结束后，检测相关指标：①采用放射免疫法检测血清E2；②采用实时荧光定量PCR法(QuantitativeReal-TimePCR,RT-RCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA的表达，计算ERα/ERβmRNA比值；③采用蛋白印迹法(Wes

5、ternblotting，WB)测定下丘脑、海马、额叶中RSK1蛋白的表达。结果：1成都中医药大学二〇一八届硕士研究生学位论文1.造模后行为学观察：与Ctl组相比，PPD组蔗糖水消耗量明显减少(P＜0.01)，OFT水平得分和垂直得分均明显减少(P＜0.01)，FST不动时间明显增多(P＜0.01)。2.药物干预后行为学观察：2w时点和4w时点，Mdl组蔗糖水消耗量、OFT水平得分较Ctl组明显降低(P＜0.01)；FST不动时间较Ctl组明显升高(P＜0.01)。S-H组、S-M组、S-L组、EB组蔗糖水消耗量、OFT水平得分均较Md

6、l组明显增加(P＜0.01，P＜0.05)；S-M组、S-L组、Ser组、EB组的FST不动时间均减少(P＜0.01，P＜0.05)。3.血清E2结果：与Mdl组相比，S-L组血清E2水平升高(P＜0.05)；S-M组、EB组血清E2水平明显升高(P＜0.01)。Mdl组较Ctl组血清E2水平虽降低，但差异无统计学意义(P＞0.05)。4.ER表达变化：Mdl组大鼠下丘脑ERα、ERβmRNA表达较Ctl组均明显下调(P＜0.05)。与Mdl组相比，EB组大鼠下丘脑ERαmRNA表达上调(P＜0.05)；其余药物干预组大鼠下丘脑ERαm

7、RNA表达较Mdl组上调，但差异无统计学意义(P＞0.05)。S-M组、EB组大鼠下丘脑ERβmRNA表达明显上调(P＜0.05，P＜0.01)。5.ERα/ERβ比值结果：Mdl组大鼠下丘脑ERα/ERβmRNA比值较Ctl组上调(P＜0.05)。与Mdl组相比，除EB组外，各处理组大鼠下丘脑ERα/ERβmRNA比值下调(P＜0.05，P＜0.01)。6.RSK1表达结果：Mdl组下丘脑、海马、额叶RSK1蛋白表达较Ctl组明显下调(P＜0.05，P＜0.01)。与Mdl组相比，各处理组下丘脑、海马RSK1蛋白表达均有不同程度上调(

8、P＜0.05，P＜0.01)；额叶中除S-M组，各处理组RSK1蛋白表达上调(P＜0.01)。结论：1.对大鼠进行HSP后激素撤退并进行行为学测试，PPD大鼠表现出明显的抑郁状态，PPD模型大鼠复制成功。2