基于itraq技术的电针抗抑郁有效靶点筛选研究

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1、社京中？！孳大等ＢＥＩＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥ博士研究生学位论文题目：基于ｉＴＲＡＱ技术的电针抗抑郁有效祀点蹄选研宄专业：针灸推拿学研究方向：针剌抗抑郁的机理与临床研究博士生：郭卓导师：图？教授二〇一五年五月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方夕卜，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得北京中医药大学或其他教

2、育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：签字日期：学位论文版权使用授权书本人完全了解北京中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人授权北京中医药大学将本人学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并允许提交杂志社出版。幵□保密（年月）（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）

3、学位论文作者签名：：＿＿＿导师签名丨上义。ｊ签字日期：：签字日期百录１＿目录＋？錢胃１Ａｂｓｔｒａｃｔ５＿贿８一第部分文献综述１０一综述抑郁症的现代研究进展１０参考文献２２二２８综述针刺治疗抑郁症机理及临床研究进展参考文献３６综述三蛋白质组学技术在抑郁症机制研究中的应用３９参考文献４３第二部分实验部分４４一电针对慢性束缚应激抑郁模型大鼠行为学的影响实验４４１．材料与方法４４２４５．实验结果３４．计论８

4、、５０４．／］￥参考文献５１实验二电针对慢性束缚应激模型大鼠海马ＣＡ３区的影响５３１５３．材料与方法２．实验结果５５３．５８４．小结６１参考文献６１实验三基于ｉＴＲＡＱ技术研究电针对慢性束缚应激引起的６３抑郁症海马组织蛋白表达的影响６３１．材料与方法６３２．１５验錢７０３７９．Ｍｊｔ、．ｉ４／］ｔ８３８３参考文献实验四ｉＴＲＡＱ结果验证部分８５１．材料与方法８５２．实验结果８８３９２．、４

5、．／ｉ９６］ｔ参考文献９７２基于ｉＴＲＡＱ技术的电针抗抑郁有效祀点的蹄选研宄总结与展望９９＾ｉｔ……１０１创新点１０３本研究存在的缺点和不足１０５１０７ＷＬＭ个人筒历１０９中文摘要＾中文摘要背景与目的近年来、中枢神经系统疾病成为全球公共健康关注的，抑郁症与药物成寐主要问题。抑都症与成癒、中枢神经系统疾病的高共病性也逐渐成为关注的热点。目前抑郁症的病生理机制尚不清楚。但是电针治疗抑郁症的临床疗效巳经得到了广泛的认可，具有疗效确切，

6、整体调节结合多ＩＥ点治疗的特点，同时对药物的毒副作用也有减毒增效作用，大量。电针抗抑郁机理研究已经备受关注研究证实电针能从多角度、多乾点、多途径起到抗抑郁作用。、人类绝大多数病理生理过程都是由蛋白质参与完成的，在疾病的发生机一体的反应以及疾病转归的每个过程，蛋白质都发挥着极其重要的作用，因此，蛋白质作为生命活动的重要组成部分，蛋白标志物的條选就成为科学家们关注的热点。因此从蛋白质水平探讨电针抗抑郁机制是十分必要的。关于致炎性细胞因子与抑郁症发病的关系已有较深入的研究，而转化生长－－因子（Ｔ

7、ＧＦＰ）及突触结合蛋白（Ｓｙｎｔａｘｉｎｌ）与抑郁症的关系研究尚不多见。本实验基于同位素相对与绝对定量（ｉＴＲＡＱ）技术，联合多维液相色谱技术与－串联质谱技术（ＬＣＭＳ／ＭＳ）分离和鉴定差异蛋白，比较电针组与模型组海马组织蛋白定量结果，对电针所干预的慢性束缚应激大鼠的海马组织蛋白进行初筛，寻找电针抗抑郁的有效祀点，最后，选用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术对部分差异蛋白进行验证。方法、本研究应用慢性束缚应激结合孤养建立抑郁大鼠模型，釆用扩场实验体质量变化情况来评价抑郁模型是否复制成功，并应

8、用免疫组化技术对大鼠海马－ＡＩＬ－ｉ组织Ｃ３区炎性细胞因子、ＩＬ６进行检测，确认大氣是否出现免疫炎症ｐ反应；同时，采用免疫组化技术对大鼠海马组织ＣＡ３区不同于其他炎性因子－－ｎ的转化生长因子ＴＧＦ、突触膜结合蛋白ｓｙｔａｘｉｎｌ阳性神经元的积分光密度Ｐ（ＩＯＤ）值进行检测；釆用ｉＴＲＡＱ试刻盒标记海马