利用cd133~+肿瘤表面标记物分离、鉴定和培养胃癌肿瘤干细胞的实验研究

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1、学术学位硕±学位论文单位代巧：１０６７８分类号Ｒ７３０．２；学号：２０１２３如密级：尾咚Ｍ牛Ａ常硕壬学位论文＋ｉＤ禾ｊ用Ｃ１３３肿瘤表面标记物分离、鉴定和培养胃癌肿瘤干细胞的实验研究院巧）、所昆明医科大学第四附属医院硏究生姓名张成龙学科、专业外科学（普外科）学位类型学术学位指导教师杨键教授二〇—五年五月尾略ｉｌ巧太常硕±学位论文＋利用ＣＤ１巧井瘤表面标记物分离、鉴定和培养胃癌肿瘤干细胞的实验研究（云南省应用基础研究、昆医联合专项编号：２０巧巧１８３）

2、研究生姓名张成龙学科、专业外科学（普外科）串请学化类巧学术学位指导教师杨铺教授完成旧期二〇—五年五月定巧廷种聲研究生学位论文研究撰写声明本人巧重声明：本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位课题研究所取得的研究成果。论文中除特别加Ｗ标注和致谢的地方外，不包含他人或其他机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研究和论文做过贡献的同道我均在论文中作了明确的说明并表明谢意一。该学位论文资料若有不实之化本人愿承担切相关责任。论文作者（签名）：－月少年々；《日堯巧Ｓ种常

3、研究生学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可公布论文的全部或部分内容（确属保密内容已注明，并在解密、后遵守此规定）；学校可采用影印、缩印或其他手段保存本学位论文。学位论文作者（签名）：＾备指导教师（签名）：－＇年月日■月乂日今戶。年６＂本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盎版）电子＂杂志社进行电子和网络出版，并编入ＣＮＫＩ系列数据库，传播本学位论

4、文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。学位论文作者（签名）：指导教师（签名）＾、／年今月＾日戸辟（月以抒目录中文搪要．．．＂１英文巧要３缩咯词一览表５引胃７材料与方法１１结Ｈ２０ｉｆ论２５结论２９参考文献３０综述３４硕±期间参与发表文章４４ｉＣ谢４５昆明医科大学硕±研究生学位论文＋利用ＣＤ１３３肿疫表面标记物分离、鉴定和培养胃癌麻癌干细胞的实验研究中文摘要＋目的

5、：检测ＣＤ１３３在胃癌（Ｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒ）肿瘤干细胞（Ｃａｎｃｅｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，＋一ＣＳＣｓ）中的表达，进步探讨ＣＤ１３３细胞在胃癌中的分布、形态特征、数量及＋其意义检测肿瘤干细胞标志物ＣＤ１３３在胃癌中的表妃了解肿瘤干细施标志＋＋物ＣＤ１３３与胃癌发生发展的关系及ＷＣＤ１３３作为胃癌肿瘤干细胞标志物的价值。方法：采用机械法分离原代培养的胃癌干细胞，观察细胞的形态采用免疫；＋磁珠分选（ｍａｇｎｅｔｉｃａｃｔｉｖａｔｅｄｃｅｌｌｓｏｒｔｉｎｇ，ＭＡＣＳ）的方法分离和培养胃癌Ｃ

6、Ｄ１３３＋肿瘤干细胞，观察含有ＣＤ１３３胃癌肿瘤干细胞球的形态；采用流式细胞术的方＋＋法检测胃癌ＣＤＢ３肿瘤细胞的阳性表达率；建立胃癌动物模型，观察ＣＤ１３３与’＋ＣＤ１巧致瘤率的情况及肿瘤大小的变化；免疫组化法观察肿瘤组织中ＣＤ１３３表达情况。结果：１．通过机械法分离出的原代培养的胃癌干细胞发现其细胞形态小而圆。Ｉ＋２．ＣＤ１３３细胞在免疫磁珠分选法分离和培养中能够悬浮生长、增殖，并且随着培养时间的増加，细胞逐渐聚集，同时形成悬浮的肿瘤细胞球。３．筛选前细胞ＣＤ１３３阳性率为５．０５％，筛选后细

7、胞阳性率为８８．０７％，筛选Ｉ后细胞的阳性率显著高于筛选前细胞的阳性率。４＋－４．本文将新鲜分选出的５Ｘ１０个ＣＤ１巧与ＣＤ１３３分别皮下注射至裸鼠蔽Ｉ＋－（（３３。下，分为阳性组ＣＤ１３３）和阴性组ＣＤ１），每组６只阳性组８２．５％成＋瘤（５／６），阴性组１６．６７％（１／６）。由表１结果可知，ＣＤ１３３肿瘤率与肿瘤大－小均高于ＣＤ１３３。１昆明医科大学硕±研究生学位论文＋５．瘤体组织通过ＨＥ染色后，可观察到ＣＤ１３３散在表达于细胞胞膜上。＋一＋结论：ＣＤ１３３是胃癌肿瘤干细胞的种表

8、面标记物，对于胃癌中ＣＤ１３３＋检测的表达强度，有利于评估肿瘤生物学行为ＣＤ１３３为胃癌肿瘤干细胞的有；效标志物。＋关键词：ＣＤ１３３；胃癌；肿瘤干细胞２昆明医科大学硕女研究生学位论文＋下ｈｅｕ