β-胡萝卜素对免疫抑制小鼠肠黏膜免疫功能的影响

β-胡萝卜素对免疫抑制小鼠肠黏膜免疫功能的影响

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1、分类号:Q939.91单位代码:10193密级:学号:2012224硕士学位论文β-胡萝卜素对免疫抑制小鼠肠黏膜免疫功能的影响Effectofβ-caroteneonintestinalmucosalimmuneoftheimmunesuppressionmice作者姓名:马思慧学位类别:理学硕士专业名称:生物化学与分子生物学研究方向:动物分子生物学与基因学指导教师:郑鑫教授所在学院:生命科学学院2015年5月独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立进行研究所取得的成果。尽我所知,除文中特别加以标注和致谢所列内容外,论文中不包含其他个人

2、或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处,本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名:签字日期:年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有,并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学,学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫

3、描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人(同意/不同意,务必打印后填写)吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版(涉密学位论文解密后应遵守此协议)。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果,必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名:签字日期:年月日指导教师签名:签字日期:年月日摘要在小鼠日粮中添β-胡萝卜素后腹腔注射环磷酰胺,建立免疫抑制模型,通过检测免疫器官指数,采用苏木素-伊红染色法观察免疫器官组织形态学变化,以验证是否建立成功免疫抑制模型;使用ELISA试剂盒检测小

4、鼠血清中免疫球蛋白的含量;使用ELISA试剂盒检测小鼠肠黏膜内sIgA的分泌量;应用免疫组织化学的方法检测小鼠空肠上皮细胞内IgA抗体分泌细胞的数量;运用半定量RT-PCR的方法检测小鼠肠黏膜内TLR2和TLR4基因的表达量。从组织、免疫球蛋白和基因表达量三个方面来查证β-胡萝卜素对免疫抑制小鼠肠黏膜免疫功能的影响。研究结果表明β-胡萝卜素可显著增强免疫抑制小鼠的脾脏指数和胸腺指数,缓解由环磷酰胺引起的免疫器官组织学形态的损害。β-胡萝卜素可显著提高免疫抑制小鼠血清中免疫球蛋白含量,增强免疫抑制小鼠的体液免疫功能。β-胡萝卜素可显著增加免疫抑制小鼠空肠肠黏膜内

5、sIgA的分泌量以及IgA抗体分泌细胞数量。β-胡萝卜素可显著上调小鼠空肠肠黏膜组织中TLR2的基因表达量,下调小鼠空肠肠黏膜组织中TLR4的基因表达量,其可能是通过结合TLR2以参与肠黏膜内的信号传导通路来发挥对小鼠的肠黏膜免疫功能的保护作用。综上所述,β-胡萝卜素可缓解由环磷酰胺引起的免疫抑制作用,保护肠黏膜免疫免受环磷酰胺引起的免疫抑制反应,本研究为β-胡萝卜素对肠黏膜免疫的具体作用机制进一步研究奠定了基础。关键词:β-胡萝卜素,免疫抑制模型,免疫球蛋白,肠黏膜免疫,Toll样受体IAbstractToestablishthemodelofimmunes

6、uppression,weaddedβ-caroteneinmicedietandinjectedcyclophosphamideinabdominalcavity.Theimmuneorgansindex,tissuesectiontechniqueandHematoxylin-Eosinstainingweredetectedtoevaluateestablishtheimmunosuppressivemodelsuccessfully.ThecontentofserumimmunoglobulinandsIgAsecretionofmiceintesti

7、nalmucosawasdetectedbyELISAkit.ImmunohistochemistrywasusedtodetectthenumbersofIgA-secretingcellsinmicejejunalepithelium.Semi-quantitativemethodtodetectexpressionlevelsofTLR2andTLR4genesinmiceintestinalmucosa.Fromthreelevelsoftheorganization,protein,genes,weveritytheimpactofβ-caroten

8、eonintestinalmucosa

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