sdf-1激活pi3k-akt通路在卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用

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1、学校代码10459学号或申请号201212443364密级公开硕士学位论文SDF-1激活PI3K/Akt通路在卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用作者姓名:雷婧导师姓名:乔玉环教授学科门类:医学专业名称:妇产科学培养院系:第一临床学院完成时间:2015年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheRoleofSDF-1intheProliferationandInvasionofOvarianCancerCellsthroughActivationofPI3K/AktSignalingPathwayByJingLeiS

2、upervisor:Prof.YuhuanQiaoObstetricsandGynecologyTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay,2015学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研宄作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:曰期:>0丨5年5月曰学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑

3、州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:智織曰期:年:r月曰摘要SDF-1激活PI3K/Akt通路在卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用研究生雷婧导师乔玉环教授郑州大学第一附属医院妇科河南郑州450052摘要目的通过观察基质细胞衍生因子-1(

4、stromalcell-derivedfactorl,SDF-1)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol3-kinase/proteinkinaseB,PI3K/Akt)信号传导通路抑制剂LY294002对卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3增殖和侵袭能力的影响,探讨SDF-1对上皮性卵巢癌细胞的增殖和侵袭产生影响的分子机制中是否有PI3K/Akt信号传导通路的作用。方法1.将卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别分为以下4组:(1)空白对照组,(2)实验组1(含100ng/mlSDF-1的培养液),(3)实验组2(含50μmol/LLY294002的培养液),

5、(4)实验组3(预先用含50μmol/LLY294002的培养液作用卵巢癌细胞0.5h后再加入含100ng/mlSDF-1的培养液)。2.将卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别在不同药物处理条件下培养24h、48h和72h后,应用四甲基偶氨唑蓝比色(MTT)法检测两种卵巢癌细胞在不同药物处理条件下培养不同时间的细胞增殖能力。3.将卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别在不同药物处理条件下培养48h后运用体外微孔隔离室板(Transwell)法检测两种卵巢癌细胞的侵袭能力。4.运用蛋白免疫印迹(WesternBlot)法检测卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别在不同药物处理条件下培养48h后,

6、Akt的磷酸化程度和基质金属蛋白酶I摘要-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)的分泌情况。结果1.不同药物处理条件下卵巢癌细胞SKOV3的MTT结果:不同药物作用24h对卵巢癌细胞SKOV3的增殖作用无明显影响,四组卵巢癌细胞吸光度值之间的差异无统计学意义(P>0.05)。不同药物作用48h和72h时,SDF-1组(实验组1)与对照组进行比较,SDF-1可以明显促进卵巢癌细胞SKOV3的增殖(P<0.05);50μmol/L的LY294002组(实验组2)以及预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1

7、组(实验组3)分别与对照组进行比较,卵巢癌细胞SKOV3的增殖能力明显减弱(P<0.05);而预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组(实验组3)与100ng/ml的SDF-1组(实验组1)进行比较,SDF-1对卵巢癌细胞SKOV3促进增殖的作用明显被抑制(P<0.05),同时预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞SKOV3后再加入100ng/

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