rna干扰对大鲵蛙病毒（cgsrv）主要功能基因表达与增殖影响的研究

《rna干扰对大鲵蛙病毒（cgsrv）主要功能基因表达与增殖影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号塑坚学号Ｓ２０１Ｕ＂６、Ｖ四川巧Ｉ化大学／＇－■硕Ｊｒ学位论文分ＲＮＡ干扰对大無蛙病奉（ＣＧＳＲＶ）主要功能基因表达与増殖影喃的研究＇产周燕＇、ｙ：，＊？？．Ｉ■＇＇■■ｒ－？Ｖ？－一．．＇－－ｈ；＾；＇指导教师耿毅教授＾。ｔ！学科专业基础兽医学－－１‘＇卢？、／＃、＇‘＇ｆ－＇研巧方向水生动物疾病．—■一一？：ｙ＂一２０１５年

2、５月－．－．－次？‘？．％心ＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎＮｕｍｂｅｒＳ９４３ＳｔｕｄｅｎｔＮｕｍｂｅｒＳ２０１２３４１６ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＲｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｍａｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎｅｎｅｅｘｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｇｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅｉａｎｔｓａｌａｍａｎｄｅｒｐｇＲａｎａｖｉｒｕｓｂｙＲＮＡｉＢｙＺｈ

3、ｏｕＹａｎＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＧｅｎｇＹｉＢａｓｉｃＶｅｔｅｒｉｎａｉｙＭｅｄｉｃｉｎｅＣｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ，ＣｈｉｎａＭａ２０１５ｙ，本研究由四八階科技支巧计划项目：大無巧病毒感染预警及巧巧关键技术研巧与示巧。０１４ＮＺ００２７）资助ＴｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙＳｉｃｈｕａｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＳｕｐｐｏｒｔＰｌａｎｎ虹Ｕ０１４ＮＺ００２７）ｇ论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人

4、在导师指导下进行研究工作所取，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外得的成果，学位论文中不包。尽我所知含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学一或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＞〇（？（／Ｘ日研巧生签名：周藏年月关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留，；学校、使用学位论文的规定即有权保留并向国家有关部鬥或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查

5、阅和借阅，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。＼／本论文不保密。□本论文保密，在＿＿年解密后适用本授权。＂＂（请在ｙｘ上□内划Ｖ）２＾＞；件年（（Ｃ研究生签名：叛月日同一导师签名：年＜月ａ日；＾ＲＮＡ干扰对大銳蛙病毒主要功能基因表达与増殖影响的研究中文摘要大魄蛙病毒（ＣｈｉｎｅｓｅｉａｎｔｓａｌａｍａｎｄｅｒＲａｎａｖｉｒｕｓ，ＣＧＳＲＶ）属于化彩病毒科、ｇ

6、一蛙病毒属，是近年来发现的种严重危害养殖大銳的新病原，其感染具有发病率，己成与死亡率高的特点，给大銳养殖业的健康发展造成了严重威胁其防控技术为人们研究的热点。ＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅＲＮＡｉ）是利用小ＲＮＡ，干扰（ｓｍａｌｌｔｅｒｆｅｒｉｎＲＮＡｓｉＲＮＡ）作为序列特异性的触发器，与细胞内同源的ｉｎｇ，ｍＲＮＡ互补配对后再由ＲＮａｓｅ皿家旗中能够特异性识别双链ＲＮＡ的Ｄｉｃｅｒ酶切断，达到，引起生物细胞内同源基因发生降解而表现出该基因特异性沉默的现象阻碍病毒

7、基因顺利表达的目的，起到预防和治巧病毒感染的目的。民ＮＡ千扰是生物进化的结果，，参与多种真核生物功能包括病毒防御、基因组重排、染色质＞重组、干细胞的维持、脑的形态建成［＾１及发育时序决定等。本研究通过化学合成的方法，合成ＣＧＳＲＶ病毒主要衣壳蛋白基因（ＭＣＰ）、甲基转移酶基因（ＭＴａｓｅ）、ＤＮＡ多聚酶基因（ＤＮＡｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ）特异的ｓｉＲＮＡ，把ｓｉＲＮＡ转染到狸鱼上皮瘤细胞（ＥｐｉｔｈｅｌｉｏｍａＰａｐｉｌｌｏｓｕｍＣｙｐｒｉｎｉ，ＥＰＣ），再进一＊行ＣＧＳＲＶ感

8、染。每１２ｈ观察次细胞病变（Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｅｆｅｃｔ，ＣＦＥ），观察Ｓ民（－ｉＲＮＡ对病毒增殖情况的影响；应用癸光定量ＰＣｑＲＴＰＣＲ）Ｗ及病毒滴度测定（ＴＣＩＤｓｏ）的方法分别对ＲＮＡ干扰实验后各基因的相对表达和病毒量及其毒，从而研巧Ｓ，自力进行检测分析ｉＲＮＡ对ＣＧＳＲＶ的影响期为大兒挂病毒病的防控提供新的技术路线。设计ＣＧＳＲＶ病毒的ＭＣＰ、ＭＴａｓｅｓ、