phbv纳米纤维对大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响

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1、馨东南大学硕±学位论文ＰＨＢＶ纳米纤维对大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响专业名称；骨科学研究生姓名：沈旭导师姓名：蒋赞利副教授ＴＨＥＳＴＵＤＹＯＮＤＤＦＦＥＲＥＮＴＩＡＴＩＯＮＯＦＭＳＥＮＣＨＹＭＡＬＳＴＥＭＣＥＬＬＳＩＮＴＯＮＥＵＲＯＮ－ＬＩＫＥＣＥＬＬＳＯＮＰＨＢＶＮＡＮＯＦｆｉＥ民ＳＦＩＬＭＳＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡ

2、ｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＢＹＳｈｅｎＸｕＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂｐｙＰｒｏｆｅｓｓｏｒ－ＪｉａｎｇＺａｎｌｉＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研巧王作及取得的研究成果，，。尽我所知除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或

3、证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研巧生签名：也心日期：雕＆引东南大学学位论文使用授权声明东南大学、国家图书馆有权保留本人所送交学位论、中国科学技术信息研巧所，可文的复印件和电子文档１＾采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子一文档的内容和纸质论文的内容相致，允许论文被查。除在保密期内的保密论文外（阅和借阅，（包括刊登）论文的全部或部分内容可Ｗ公布。论文的公布包括刊登）授权东南大学研究生院办理。〇

4、研巧生签名；池批导师豁名：日期；）沒去ｉ、中文巧要中文摘要ＰＨＢＶ纳米纤维对大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响目的：探究静电纺丝制备的聚姪基Ｔ酸戊酸共聚酷＊－－－－ｖａ（Ｉｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅｃｏ３ｈｙｄｒｏｘｙｌｅｒａｔｅ，ＰＨＢＶ）纳米材料对大鼠骨髓间充质干细胞（Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＢＭＳＣｓ）粘附、増殖Ｗ及向神经元样细胞分化的影响，为ＰＨＢＶ纳米材料与骨髓间充质干细胞联合移植治

5、疗脊髓损伤提供新的依据。－：取４周龄（１００１２０）的ＳＤ大鼠，，方法ｇ，将股骨和腔骨分离出从中提取骨髓ＳＣｓ：采用贴璧分离培养的方法分离纯化大鼠ＢＭ，待细胞融合８０％后１２４＞＜分瓶传代，传至第３代时，细胞计数后，＾＾２１〇／１１（１１接种至静电纺丝制－ＮＦ与非定向Ｒ－ＮＦ备的ＰＨＢＶ纳米纤维膜（定向Ａ）上，Ｗ接种至玻片上为对照组，倒置显微镜下观察对照组细胞形态。用电镜观察细胞与ＰＨＢＶ纳米纤维膜的粘附情况，于培养第１４、７，、天时使用细胞计数试－剂盒ＣＣＫ８检测各组细胞增

6、殖情况，。待细胞与ＰＨＢＶ纳米纤维膜融合后Ｗ维甲酸（ＲＡ）作为増殖及分化诱导因子，每孔加入２００ｕＬ对ＢＭＳＣｓ进行增殖培养，倒置显微镜下观察对照组细胞生长形态的变化，、分化诱导％多聚甲醒固定ｎ－于第２、４、６天将各姐细胞采用４，封闭，用Ｎｅｓｔｉ，ＭＡＰ２，ＧＦＡＰ抗体行化学染色鉴定神经干细胞，神经元和神经胶质细胞的生成情况。结果ＳＣｓ，定向与非定向ＰＨＢＶ纳米：ＢＭ与ＰＨＢＶ纳米纤维膜有很好的相容性－－纤维膜均能很好的促进细胞增殖，第，ＡＮＦ与ＲＮＦ表面细胞略多１天－－

7、，于玻片上的细胞，ＡＮＦ与玻片上细胞无统计学意义（Ｐ＞０．０５）ＲＮＦ表＜〇－ＮＦ与面细胞与两者皆有统计学意义（Ｐ．〇５），第４天及第７天时，Ａ－－－ＲＮＦ表面细胞显著増长，其中ＲＮＦ表面细胞増殖显著高于ＡＮＦ表面，Ｐ＜〇〇５，且＜具有统计学意义（．）两者与玻片细胞均有统计学意义（Ｐ－０。ＮＦ表面的细胞沿巧维方向生长，其形态被显著拉长。加入维．０５）在ＡＩ东南大学硕±学位论文甲酸（ＲＡ）诱导剂２４ｈ后，细胞形态开始变化，胞体开始回缩，突起逐渐伸出。免疫巧光染色示ＰＨＢ

8、Ｖ纤维膜上的细胞在第２天即可检测到－化ｓｔｉｎ阳性细胞的表达，第４天可检测到ＭＡＰ２，ＧＦＡＰ阳性细胞表达，４－对照玻片姐第天开始表法Ｎｅｓｔ，第６天开始表达ＭＡＰ２，ＧＦＡＰｉｎ抗体抗体。－－结化Ａ师和ＲＮＦ均能很好的促进细胞增殖有良好的相容性－，且ＲＮＦ表面，－ＮＦ表面细胞増殖显著高于Ａ。定向纳米巧维通过引导细胞骨架延伸从而对细胞形貌产生显著影响，使着细胞沿着纤维方向定向生长，这和神经细胞轴