n-3hufa对西伯利亚鲟亲鱼繁殖力及子代发育和脂肪代谢的影响

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1、密级：论文编号:中囯农北科学院学位论文n-3HUFA对西伯利亚鲟亲鱼繁殖力及子代发育和脂肪代谢的影响Effectsofn-3HUFAontheReproductivePerformance,OffspringGrowthPerformance,LipidMetabolismofSiberiaSturgeon{AcipenserbaeriBrandt)硕士研究生：艾立川指导教师：薛敏研究员申请学位类别：农业推广硕士专业领域名称：养殖培养单位：中国农业科学院饲料研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalS

2、ciencesDissertationEffectsofn-3HUFAonthereproductiveperformance,offspringgrowthperformance,lipidmetabolismofSiberiasturgeon(AcipenserbaeriBrandt)M.S.Candidate：AiLichuanSupervisor：Prof.XueMinDegree：MasterofAgriculturalExtensionSpecialty:BreedingMay2015摘要西伯利亚鲟（AcipenserbaeriBrandt）属鲟形目（

3、Acipenseriforme)，鲟科，是一类古老的软骨硬鳞鱼类，在鱼类进化史上占有重要地位，有活化石之称。同时也是我国重要的经济鱼类养殖品种，产量居世界之首。本研究分别以西伯利亚鲟亲鱼及仔稚鱼作为试验对象，研究饲料中n-3HUFA水平对亲鱼繁殖性能、脂肪代谢、仔稚鱼质量的影响以及饲料中不同DHA/EPA比例对仔鱼早期生长发育、脂肪代谢及抗氧化能力的影响，并探索通过开口期营养规划来改善其对低n-3HUFA饲料的利用能力的可能性。本研究内容共分为以下四个部分，分别摘要如下：试验一西伯利亚鲟PPARα、LPL和HL基因全长cDNA克隆与序列分析本试验通过反转录聚合酶链

4、式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆西伯利亚鲟（Acipenserbaerii）肝脏中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、脂蛋白酯酶(LPL)、肝酯酶(HL)基因全长cDNA序列。结果显示：西伯利亚鲟肝脏中PPARα基因（GenBank登录号KJ534588）cDNA全长1736bp，包括158bp的5’非翻译区、1401bp的开放阅读框及177bp的3’非翻译区；开放阅读框编码1个由466个氨基酸组成的蛋白质，预测其分子质量为52.3ku，与其他物种的相似性为75.5%~82.4%；LPL基因（GenBank登录号KJ7209

5、72）cDNA全长1760bp，包括163bp的5’非翻译区、1506bp的开放阅读框及91bp的3’非翻译区；开放阅读框编码1个由501个氨基酸组成的蛋白质，预测分子质量为57.1ku，与其他物种的相似性为48.7%~67.0%；HL基因（GenBank登录号KJ720973）cDNA全长1740bp，包括124bp的5’非翻译区、1500bp的开放阅读框及116bp的3’非翻译区；开放阅读框编码1个由499个氨基酸组成的蛋白质，预测分子质量为56.4ku，与其他物种的相似性为55.4%~67.1%。通过构建系统发育进化树发现，西伯利亚鲟PPARα与高等脊椎动物

6、的亲缘关系较近，LPL、HL与鱼类亲缘较近。本试验通过对西伯利亚鲟PPARα、HL、LPL基因同源性、系统进化地位的分析，为进一步研究西伯利亚鲟脂肪代谢调控机制奠定了分子生物学基础。试验二n-3HUFA对西伯利亚鲟亲鱼繁殖力及其子代生长发育的影响本试验设计两种等氮等能的膨化沉性饲料，n-3HUFA的含量分别为2.95%和1.79%，分别命名为H组和L组。分别饲喂雌雄两种性别的西伯利亚鲟亲本，试验周期11个月。在繁殖期间，记录亲本繁殖性能指标，并分别取不同亲本来源的仔稚鱼统计开口期存活率；仔稚鱼根据亲本来源分为D1（H♀×H♂）、D2（H♀×L♂）、D3（L♀×H♂

7、）、D4（L♀×L♂）4个处理组，每个处理组3个重复，并记录仔稚鱼期间生长、存活状况。试验结果表明：H组雌性亲本的相对怀卵率、卵重均高于L组，但未达到显著水平（P>0.05）；H组鱼卵中n-3HUFA含量显著高于L组并且H组卵径显著高于L组（P<0.05）；H组中雄性亲本精子平均曲线运动速度（VCL）、平均直线运动速度(VSL)均显著高于L组（P<0.05），精子活率高于L组但未达到显著水平，精液密度、平均路径运动速度(VAP)、精子平均侧摆幅值(ALH)、精子平均打鞭频率(BCF)、精子平均移动角度(MAD)均无显著性差异（P>0.05）。H组亲鱼血清中TC的含

8、量H组与L