mir-146a调控toll-like recetor4信号通路在肠缺血及缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

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1、硕士学位论文miR-146a调控ToH-likereceptor4信号通路在肠缺血及缺血再灌注损伤中的作用及机制研究院（系)、所临床医学院四川医科大学毕业硕士研究生学位论文独创性声明及发表承诺书本人声明所呈交的学位论文（已整理成发表形式）是我个人在四川医科大学导师指导下，由导师及四川医科大学提供一切科研条件的情况下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在即将毕业离校之际，本人郑重承诺：该论文将以四

2、川医科大学的名义发表（论文作者为研究生及导师，作者所在单位为四川医科大学），并在发表后立即将发表论文原件（期刊）寄与导师1册。四川医科大学硕士学位论文版权使用授权书本人完全了解四川医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：四川医科大学有权保留并向有关部门或机构送交本人学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，允许有关部门或机构以电子出版物形式出版发行，并对外进行全文内容服务。本人授权四川医科大学可以将本人学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，进行数字化处理汇编、通过网络或其它途径进行交流传播，可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用

3、影印、缩印、扫描或其他复制手段保存和汇编学位论文，即四川医科大学具有本人学位论文的数字化制品复制权、信息网络传播权和汇编权。同时授权将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《万方数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。保密□,在年解密后适用本授权书。本人提交的学位论文属不保密学位论□期地址及邮政编码：联系电话：联系电话:电子信箱：目录1miR-146a调控Tolllikereceptor4信号通路在肠缺血及缺血再灌注损伤中的作用及机制研究………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………

4、………………………………………………41.3前言……………………………………………………………81.4材料与方法……………………………………………………131.5结果……………………………………………………………331.6讨论……………………………………………………………481.7结论……………………………………………………………661.8参考文献………………………………………………………671.9英汉缩略词对照表……………………………………………752致谢……………………………………………………………773Toll样受体4与肠缺血再灌注损伤关系研究

5、进展（综述）…………………………………………………………………794攻读硕士期间发表的论文……………………………………96miR-146a调控Toll-likereceptor4信号通路在肠缺血及缺血再灌注损伤中的作用及机制研究摘要目的：在体外模拟肠缺血及缺血再灌注，探讨miR-146a及TLR4-TRAF6-NF-κB通路在其中的作用情况，为肠缺血的早期诊断及缺血相关性损伤之治疗提供理论基础。方法：利用大鼠肠上皮细胞（intestinalepithelialcell，IEC-6），分别以1h、2h、3h建立不同时间缺血模型（I1h、I2h、I3h）

6、，以缺血1h再灌注1h建立缺血再灌注模型（I1hR1h），再在I1h组及I1hR1h组中调控miR-146a的表达，利用实时定量PCR检测各组miR-146a、TLR4、TRAF6、RIP、XIAP的mRNA表达水平，利用流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western-Blot检测HIF-1α、TLR4、TRAF6、RIP、XIAP、SCOS-3、NF-κB、cleaved-Caspase-3蛋白表达。实验数据采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，两样本均数比较采用t检验，多样本均数多重比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。结果：（1

7、）HIF-1α在缺血时表达显著增加(P<0.01)，再灌注处理后其表达下调，迅速趋于正常水平。（2）肠缺血患者血浆中，miR-146a的表达显著下降(P<0.01)。（3）缺血1h后miR-146a的表达显著降低（P<0.01），以后随着缺血时间的延长而缓慢恢复，但始终低于正常；I1hR1h组的miR-146a水平高于I1h组(P<0.05)，但仍显著低于正常(P<0.05)。（4）细胞在缺血1h、2h、3h情况下的凋亡率会随着缺血时间的延长而逐渐升高，但缺血2h时与缺血3h时比较无统计学意义；I1hR1h组的凋亡率较I1h组更高（P<0.05）。（

8、5）1在TLR4、TRAF6、RIP的mRNA水平与TLR4、TRAF6、RIP、NF-κB、cleaved