gigyf1基因沉默对h9c2心肌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

《gigyf1基因沉默对h9c2心肌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：Ｑ７５密级：Ｗ或／、ｆ研巧生学位论文ＧＩＧＹＦ１基因沉默对Ｈ９Ｃ２也肌细胞増殖、调论文题目（中文）ｔ：的影响及机制研究＊Ｔｈｅｓｔｕｄｏｆｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅａｏｔｏｓｉｓａｎｄｙｐ，ｐｐ论文题目（外文）ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍａｆｔｅｒＧＩＧＹＦｌｋｎｏｃｋｄｏｗｎｉｎＨ９Ｃ２ｍｏｃａｒｄｉａｌｃｅｌｌｙ研巧生姓名孔祥贞学科？、专业生物学遗传学研究方向医学遗传学学位级别硕壬导师姓名、职称谢小冬教授论文工作起止年月２０１３年９月至２０１５年１月论文

2、提交日期２０１５年４月论文答辩日期２０１５年５月学位授予日期２０１５年６月校化：甘巧省兰州市原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研巧所取得的成果。学位论文中凡引用他人己经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研巧成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。《、论文作者签名：日期：《全—关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职

3、务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或一与该论文直接相关的学术论文或成果时，第署名单位仍然为兰州大学。本学位论文研究内容；□可Ｗ公开□不宜公开已在学位办公室办理保密申请。，，解密后适用本授权书一＂＂（请在Ｗ上选项内选择其中项打Ｖ）才＾乂导师签名论文作者签名：夺：＇Ｕｌ可．．日

4、期：日期：（ＩＧ、ＩＧＹＦｌ基垣沉默对Ｈ９Ｃ２也肌细胞増殖、微亡的影响及机制研究中文摘要目的：利用ＲＮＡ干抛皮术抑制ＧＩＧＹＦ１基因在Ｈ９Ｃ２也肌细胞中的表达，Ｆ１２屯、研究ＧＩＧＹ基因对Ｈ９Ｃ肌细胞增殖、调亡和分化的影响，并探讨相关分子、脏病的早期筛查提供理论基础生物学机制，为临床上先天性屯。ｓＲＮＡ片２也肌细胞方法；利用脂质体转染方法，将ｉ段转染进入Ｈ９Ｃ，干－ｅｓ预Ｈ９Ｃ２也肌细胞ＧＩＧＹＦ１基因表达，利用ｑＲＴＰＣＲ和Ｗｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术检测ＧＩＧＹＦ１基因被沉默后的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平，筛选出最佳ｓｉＲＮＡ干扰的最

5、佳方案；将筛选出的转染片段转染进入Ｈ９Ｃ２也肌细胞后，通过流式细胞仪和－、细胞集落实验检测细胞调亡和增殖情况的变化ＰＣ民研究ＧＡＴＡ４Ｎｋｘ２．５、；用艮ＴＴｂｘ５基因的ｍＲＮＡ表达水平，初步分析Ｈ９Ｃ２也肌细胞的分化是否受到影响；一－ｅｓｅｒｎｂ－用Ｗｔｌｏｔｉｎｇ检测ｐ３８、ＰＭＮＫ１和ＰＥ圧４Ｅ的蛋白表达量，进步探讨Ｈ９Ｃ２也肌细胞中ＧＩＧＹＦ１基因沉默所导致的细胞增殖及分化发生变化的分子生ｔ－、ｃａｓａｓｅ物机制。与此同时，Ｗｅｓｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ检测ＰＡＫＴ、ｐ５３Ｂａｘ和ｐ３的蛋白表达量，探讨Ｈ９Ｃ２也肌细胞中ＧＩＧＹＦｌ基因沉默所导致的细

6、胞调亡的分子生物机制。、ｍＲＮＡ结果：有两对ｓｉＲＮＡ片段转染进入Ｈ９Ｃ２屯肌细胞后，ＧＩＧＹＦ１基因的和蛋白表达量明显下调（Ｐ＜０．０１）。ＧＩＧＹＦｌ基因被沉默后，ｓｉＲＮＡ１８６９转染组－ＣＯ和ｓｉＲＮＡ５％转染组的细胞调亡率显著髙于ＦＡＭｓｉＲＮＡ转染组（Ｐ．Ｏｌ），且ｓｉＲＮＡ１８６９转染组和ｓｉＲＮＡ５Ｗ转染组细胞核染色结果显示细胞核染色质出现了明显凝集和裂解的现象。而细胞集落实验中ｓｉＲＮＡ１８６９转染组和ｓｉＲＮＡ５５６转染－Ａ转染组（ＰＣＯｓ．Ｏｌ）。当ＧＩＧＹＦｌ基因表达ｍ的细胞克隆数明显低于ＦＡＭｉＲＮｓｉＲＮ８的ｉＲＮ下调时，

7、Ａ１转染组和ｓＡ５％转染组细胞ＧＡＴＡ４的相对表达量显著－ｓＣＯｔｉｎ化ｆ空白对照组和ＦＡＭｉＲＮＡ转染组（Ｐ．Ｏｌ）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｇ试验中，ｓ－－－ｉＲＮＡ１８６９转染组和ｓｉＲＮＡ５５６转染组ＰＡＫＴ、ｐ３８、ＰＭＮＫＩ和ＰＥＩＦ４Ｅ的蛋白表达量，显著低于空白对照组（ＰＣＯ．Ｏｌ）；空白对照组的ｐ５３、Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ３的蛋白表达量要显著低于ｓｉＲＮＡ１８的转染组和ｓｉＲＮＡ５５６转染组（Ｐ＜０．０１）。结论：