anp信号在小鼠哮喘发病中的作用及其机制探讨

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1、分类号：民５６２．２学校代码；１０６０１密级：公开编号；Ｙ１２００２０６５禱挂各ｇ聲處ＧＵＩＬＩＮＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文１ＡＮＰ信号在小鼠哮喘发病中的作用及其机制探讨学科专业：内科学研究方向：支气管哮喘研究生姓名：高远学号：Ｙ１２００２０６５学位类型：科学学位导师姓名：曾锦荣教授二０—五年五月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中特别加＾＾标注和致谢的地方外，论文中不包含

2、其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得桂林医学院或其一他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名；签字曰期；Ｔ年《月巧鳥＞１云学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留及使用学位论文的规定，：学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可ｌｉｌ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可（＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保、汇编学位论文、存

3、。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名；导师签字為达；／＂签字曰期＾月名：曰；＞１＾年日签字曰期ｗｔ（月３目录ANP信号在小鼠哮喘发病中的作用及其机制探讨（论文题目）……………………………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………………1ABSTRACT………………………

4、……………………………………………3英汉缩略词对照表…………………………………………………………6前言…………………………………………………………………………81材料与方法…………………………………………………………………101.1实验对象…………………………………………………………………101.2主要实验仪器和试剂……………………………………………………101.2.1主要仪器设备…………………………………………………………101.2.2主要试剂和耗材………………………………………………………111.3主要试剂的配制…………………………………………

5、………………121.3.1小鼠致敏和激发溶液OVA的配制…………………………………121.3.2ANP雾化吸入溶液的配制…………………………………………121.3.3支气管肺泡灌洗液（BALF）的配制…………………………121.3.4PBS溶液的配制…………………………………………………121.3.5封闭液的配制………………………………………………………132.实验方法…………………………………………………………………132.1支气管哮喘模型小鼠的建立……………………………………………132.2小鼠肺组织病理学检测及病理学分析……………………………

6、…142.3小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)的搜集……………………………162.4ELISA测定正常组和哮喘组小鼠支气管肺泡灌洗液中的ANP因子的量……………………………………………………………………………1632.5ELISA测定4组小鼠支气管肺泡灌洗液中的IL-4因子的含量…………………………………………………………………………162.6ELISA法测定4组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IFN-γ因子的含量……………………………………………………………………………172.7各组小鼠肺组织转录因子T-Bet和GATA-3的免疫组织化学染色…1

7、82.8Western-blot(WB)法，检测4组小鼠肺组织特异性转录因子NPRA、T-Bet及GATA-3蛋白变化趋势……………………………………………182.8.1蛋白提取……………………………………………………………192.8.2蛋白定量……………………………………………………………192.8.3凝胶、电泳及转膜…………………………………………………202.8.4加一抗、二抗及显色曝光后并分析………………………………212.8.5条带分析……………………………………………………………213统计分析…………………………………………………………

8、………224结果…………………………………………………………………………234.1小鼠造模后行为学变化…………………………