2011-2012年江浙部分地区h9n2 aiv分子流行病学调查

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1、分类号Ｓ８５８．３１学号？＿＿＿為请農違义羣硕壬学位论文２０－ＡＩＶ分子１１２０１２年江浙部分地区Ｈ９Ｎ２流行病学调查安凤娇＇指导教师李样瑞教授专业学位兽民硕±研究领域预防兽医学研究方向兽医公共丑生答辩日期二〇—五年五月■？■？ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＥＰＩＤＥＭＩＯＬＯＧＹＳＵＲＶＥＹＯＦＨ９Ｎ２ＡＩＶＩＮＪＩＡＮＧＸＩＡＮＤＺＨＥＪＩＡＮＧＤＵＲＩＮＧ２〇ｎＴＯ２０。ＢＡｎＦｅｎｉａｏｙｇｊＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂＰｒｏｆ．ＬｉＸｉａｎｒｕｉ＆Ｐｒ

2、ｏｆ．ＬｉＹｉｎｙｇＡＴＨＥＳＩＳＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＩｎ化ｒｔｉａｌ化脚１１１１６１１１ｏｆＴｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｑ化ｒＴｈｅＭａｓｔｅｒｏｆＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌＤｅｇｒｅｅｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅＣｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎＭａｙ，２０１５ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＭａｙ，２０１５原创性声明．本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研。究工作所取得的成果除文中已经注明引用的

3、内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名：年月曰ｆ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可１＾＾将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库．进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书

4、。本学位论文属于不保密＿＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）１０＾学位论文作者（需亲笔）签名；月日＇导师（需亲笔）签名：＾々／＾年＾月义＞日＿Ｓ＿５目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ符号誦Ｖ第一章文献综述１１．１禽流感概述１１．２Ｈ９Ｎ２亚型禽流感１１．３病原学２１．３．１病毒体２１．３．２禽流感病毒的基因组结构及其编码蛋白２１．４禽流感病毒增殖特点３１．４．１禽流感病毒的膜融合３１．４．２禽流感病毒基因组转录与复制３１．５含流感病毒的致病力因素４１．５．１血凝素（

5、ＨＡ）４１．５．２神经氨酸酶（ＮＡ）４１．５．３核蛋白（ＮＰ）５１．５．４基质蛋白（ＭＰ）５１．５．５非结构蛋白（ＮＳ）５１．５．６聚合酶（ＰＢ１、ＰＢ２、ＰＡ）６１．６禽流感病毒的抵抗力６１．７禽流感病辜的检测和防治６１．７．１检测方法６１．７．２防治方法７１．８禽流感疫＆７１．８．１全病毒灭活苗７１乂２．亚单位疫苗７１．８．３重组活载体疫苗８Ｌ８．４核酸疫苗８１．８．５反义基因工程疫苗８１．９本研究的目的与意义８ｉ，＿２０－１１２０口年江

6、浙部分地区拟Ｎ２ＡＩＶ分子流行病学调查第二章Ｈ９Ｎ２亚型禽流感病毒基因序列分析１１２．１试验材料１１２丄１病毒样本来源１１２丄２阳性血清１２２丄３实验动物和鸡巧１２２丄４试剂纖器１２２丄５引物１２２．２试验方法１３２．２．１１％鸡红细胞的制备１３２２．２４１３．单位抗原制备２２．３病毒的初步整定１４．２．２．４病毒增殖与纯化１４２．５．２病毒ＲＮＡ提取与反转录１４２．２．６聚合酶链式反应（ＰＣＲ）退火温度的选择１５２．２．７目的片段的回收１５２．２．８感受态细

7、胞的制备１５２．２．９载体连接与转化１５２．２．１０提取质粒１６２．２．１１序列拼接与比对１６２．３试验織１７２．３．１血凝和血凝抑制试验结果１７２．３．２ＰＣＲ退火温度的选择１７２．３．３ＨＡ基因序列分析１７２．３．４ＮＡ基因序列分析２２２３５ＭＰ．．基因序列分析２６２．３．６ＮＰ基因序歹！｜分析２９么３．７ＮＳ基因序列分析３２２．３．８ＰＢ１基因序列分析３５２．３．９ＰＢ２基因序列分析３８２．３．１０ＰＡ基因序列分析４２２．３