褐飞虱胰岛素受体基因分析与功能研究

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1、分类号：单位代码：密级：无学号：硕士学位论文着中文论文题目：褐飞虱胰岛素受体基因分析与功能研究英文论文题目：申请人姓名：卢博指导教师：徐诲君副教授合作导师：王强研究员专业学位类别：农业推广专业学位专业学位领域：植物保护所在学院：农业与生物技术学院论文提交日期分类号：单位代码：密级无学号：硕士学位论文中文论文题目：褐飞虱胰岛素受体基因分析与功能研究英文论文题目：、申请人姓名：指导教师：徐诲君副教授合作导师：王强研究员专业学位类别：农业推广专业学位专业学位领域：植物保护所在学院：农业与生物技术学院论文提交日期褐飞胰岛素受体基分析与功能研究论文作者签名指导教师签名：

2、仰论文评阅人隐名评阅学位论文省略评阅人评阅人答辩委员会主席：徐志宏教授浙江农林大学委员王强研究员浙江省农业科学院委员张传溪教授浙江大学答辩日期：年月日Geneticandfunctionalanalysisofinsulinreceptorgenesofbrownplanthopper(Nilaparvatalusens、一姓名职称单位下同）隐名评阅学位论文省略姓名职称单位：浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，

3、也不包含为获得浙江大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书）签字曰期：年彡月乂曰签字曰期：年月；曰本研宄承蒙与国家自然科学基金灰飞虱对水稻黑条矮缩病毒的体液免疫应答的信号通路研宄资助摘要褐

4、飞虱，隶属半翅目、飞虱科，为单食性害虫，只能在水稻和普通野生稻上取食和繁殖，是我国和许多亚洲国家当前水稻的首要害虫。目前，由于集约式农业生产、不科学地使用化学肥料和杀虫剂，造成其种群间歇性爆发成灾。毘虫胰岛素信号转导可以调节生物体的生长发育、代谢、生殖以及衰老等重要的生理过程。因此，阐明褐飞虱胰岛素信号通路调控的分子机制，可为防虫治虫提供重要的理论基础。本研究通过’和’克隆得到褐飞虱两个胰岛素受体和的序列，全长分别为和其开放阅读框分别为和分别编码和个氨基酸残基，预测蛋白分子量分别是和。为了验证和的生物学功能，本文通过技术分别沉默了褐飞虱和基因的表达，结果发现对

5、褐飞虱的生长、发育和代谢起着决定性的调控作用，主要结论如下：（沉默导致褐飞虱成虫后足胫节长度缩短约沉默导致褐飞虱发育迟缓，使龄发育至成虫的历期延长了约沉默导致褐飞虱生长缓慢，使蛻皮后和的龄若虫体重分别降低约和沉默导致褐飞虱脂类代谢异常，使龄若虫和雌成虫的甘油三酯含量分别增加了约和。上述结果说明是典型的胰岛素受体基因，而沉默对褐飞虱没有明显影响，其功能有待进一步的研究。关键词：褐飞虱；胰岛素信号通路；胰岛素受体；生长发育；代谢AbstractThebrownplanthopper(BPH),Nilaparvatalugens(Hemiptera：，：：目录目录第

6、一章文献料褐飞虱概况褐飞虱的特征及危害褐飞虱防治新形势狭岛素及其信号转导的研究概况胰岛素胰岛素信号通路昆虫胰信号通路昆虫胰岛素受体昆虫胰岛素信号途径的生理功能昆虫狭岛素信号通路与其它激柰的相互作用昆虫胰岛素信号与蛻皮激素的相互作用昆虫胰岛素信号通路与保幼激素的相互作用技术的研究进展技术研究在害虫防治领域中的应用第二章常用仪器、试剂与方法常用仪器及主要试剂常用仪器主要试剂常规试剂配制培养基琼脂糖凝胶电泳磷酸缓冲液配制抗生素的配制试剂试剤錄实验絲法制备大肠杆菌感受态细胞浙江大学硕士学位论义载体的连接热击转化质粒提取酶切民应琼脂糖凝胶回收纯化褐飞虱总的提取及反转录褐

7、飞虱的合成实时荧光定量干扰技术操作步骤的合成毛细管注射针的制作褐飞虱摆放板制作显微注射第三章褐飞虱胰岛素受体基因的克隆及序列分析材料与方法实验方法生物信息学分析褐飞虱胰岛素受体基因克隆及分析和基因全长序列的基本信息和尺基因信号肽和跨膜区域预测和蛋白结构域的预测昆虫进化树的构建和基因组座位分析第四章褐飞虱基因的功能研究实验材料供试昆虫与饲养条件菌株与载体试剂盒仪器目录实骚方法褐飞虱及基因的合成褐飞虱及基因的褐飞虱甘油三酯含量测定实时荧光定量实验结果干扰后的基因沉默效果检测对褐飞虱体型调控对褐飞虱体重的调控对褐飞虱发育历期的调控对褐飞虱脂代谢的调控讨论第五章褐飞虱

8、胰岛素受体蛋白的原核表达及多克隆抗体制