蜜环菌液体培养条件优化及降血脂作用的研究

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1、蜜环菌液体培养条件优化及降血脂作用的研究OptimizationofculturemediumandreduceBlood-LIPidofArmillariamellea作者姓名：柳运波领域（方向）：生物制药指导教师：邢述教授类别：工程硕士答辩日期：2015年5月29日摘要蜜环菌(学名:Armillariamellea)是隶属于真菌界，担子菌门，并且它是名贵药用兰科植物天麻、猪茶生长过程中必不可少的共生菌，蜜环菌在全世界侵染600多种树木，导致树林死亡，造成很大的经济损失。近些年来，蜜环菌的药用价值和荧光特性受

2、到广泛关注。蜜环菌和蜜环菌发酵液与天麻有相似的药理作用，可作用于神经中枢，调节睡眠，增加免疫力等作用[17]。发光性是蜜环菌的重要特征之一，在充足的氧气、适宜的湿度、温度和酸碱度下，生长旺盛的蜜环菌幼嫩部分就会发出白绿色的荧光，这种光是一种冷光，无热感。蜜环菌发光特性已经被用于基因标记和作为生物传感器，国外报道蜜环菌发光特性可以用于环境检测，然而关于蜜环菌生物体发光最优培养活条件的研究确很少。因此找出最优化的培养条件利于蜜环菌的生长和发光对促进蜜环菌产业发展有重要作用。本研究旨在通过探索蜜环菌发酵条件中碳源、温

3、度、PH值、光照对蜜环菌的生长和发光特性的影响，为实现蜜环菌培育做一些基础工作。1、分别以葡萄糖、淀粉、半乳糖、乳糖、蔗糖等不同碳源替代基础培养基中的果糖配制六组发酵培养基，发现蜜环菌在淀粉养基上菌索萌发时间最短，生长速度最快，且菌索发达，对发光强度没有影响，试验证明为淀粉做为碳源是最优的选择。2、将配制好的培养基5ml，加入到直径35mm培养皿中，接种，分别于5℃、15℃、25℃、30℃发酵，对菌丝的发光和生长率进行测量，温度对蜜环菌的生长和发光都有影响，适合菌体生长和发光最佳的温度为25℃。3、将5ml按最

4、佳碳源配制好的培养基，加入到培养皿（35mm）中，接种，在不同的光照周期下进行培养，分别为24小时光照、12小时光照/12小时黑暗、24小时黑暗，光照影响菌丝体发光，但是不影响蜜环菌生长，蜜环菌在不光照的条件下培养发光亮度最高，其次是光照12h的培养条件，最暗的是完全光照的条件下培养。4、将5ml按最佳碳源配制好的培养基，灭菌后，用盐酸或氢氧化钠，培养基内培养液pH分别调整为3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、7.0，然后放I入到培养皿中（35mm）接种，于25℃避光培养PH值是3.5的时候

5、，最适合蜜环菌发光，PH值是5.5的时候菌丝体发光最弱，PH值是4.5的时候，菌丝体的生长速度最快。5、将提取密环菌多糖150mg/kg、100mg/kg连续喂养高血脂症模型大鼠，不断的检测高血脂症模型大鼠血清中TG、TC及LDL-C的过程中我们可以看出其水平在不断降低。实验结果表证实蜜环菌多糖具有一定的降血脂的作用。关键词蜜环菌、优化培养、蜜环菌发光、降血脂IIAbstractArmillaria(scientificname:Armillariamellea)ispartoftheFungi,Basidio

6、mycota,anditisthessentialsymbioticbacteriaofavaluablemedicinalplantsTianmaandgrifola’sgrowthprocess.Inrecentyears,themedicinalvalueandfluorescenceofArmillariaattractedwideattention.Inmedicalfield,itcancalmcenter,improvesleep,enhanceimmunityandregulatenervean

7、drelatedproductsisaneffectivedrugtreatmentofheadache,dizziness,weaknessandotherdiseases.LuminescenceisoneoftheimportantfeaturesofArmillaria,insufficientoxygen,properhumidity,temperatureandpH,theyoungtenderpartsofvigorousgrowthArmillariawillsendwhiteandgreenf

8、luorescence,thelightisacoldlight.Nothermal,forbacteriainchemicalenergydirectlyintoluminousenergy.Armillarialuminescencepropertieshavebeenusedasgeneticmarkersandbiosensors,foreignreportsthelumine