落新妇苷对肠道cd103a~+树突状细胞活性的调控及其机制

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1、．中，＜ＷＶ—，杏巧请知六公、古巧货黃诗共分类号Ｘ学号－两牡＿＿＿＿Ｖ、爲、终、聲齊竣叫Ａ葦ｉ餐ＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ—ｙ一＇＂一，？／—公寺．、、空：ｒ硕壬学位冷文个游追如、＇＇‘＊＇－／扔．（学术型），令一＇＇廷－］．记己賓＋落新妇巧对肠道加１〇３３树突状细胞活性的调控及其机制概？取自２ｊ一江苏扬州指导教师姓名：下岩冰主任，扬州市第人民医院，，２２５００１＇、申请学位级别：硕去学科专业名称；内科学（消化内科）：打分＿论文提交日期、：

2、２０１５年４月论文答辩日期：２０１５年６月２曰．三中：：学位授予单位：损州大学学位授予日期：２０１５年６月３０曰＇答辩委员会主席＝张国新教授嚴知＼；＾游…、名ｒ、条名巧？＇＂＇？，苗从？某這梦＾餐秦＾：１；＾（、一＇￣．？、；．．一巧撫沸載繳１＼．巧济論＋０１乔阿会：落新妇昔对肠道ＣＤ１３ａ树突状细胞活性的调控及其机制＿＋落新妇昔对肠道ＣＤ１０３ａ树突状细胞活性的调控及其机制中文摘要一炎症性肠病（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｂｏｗｅｌ出ｓｅａｓｅ，旧Ｄ）作为类肠道慢性、非特异

3、性、炎症。性疾病，主要包括溃瘍性结肠炎和克罗恩病该疾病目前治疗方法局限，有效率低且副作＋用多。肠道树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓＤＣ）主要包括ＣＤ１０，３ＣＸ３ＣＲｒＤＣ和－＋一ＣＤ１０３ＣＸ３ＣＲ１ＤＣ两个亚群。落新妇巧（ａｓｔｉ化ｉｎ）是±获《的主要单体成分之，课题组前期工作已经证明，落新妇昔可Ｗ抑制ＤＳＳ肠炎小鼠的发病，促进ＤＳＳ诱导肠炎小鼠＋体内ＣＤ１０３ａＤＣ频率的上调，及诱导调节性Ｔ细胞（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙＴｃｅｌｌｓＴｒｅ）产生。本研，ｇ＋一Ｄ究拟进步探讨落新妇巧对肠道Ｃ１

4、０３ＤＣ亚群细胞活性的影响及其分子机制。【目的】■＋＋观察落新妇巧对ＤＳＳ诱导肠炎小鼠脾脏及厮道ＣＤ１０３ａＤＣ分布的影响，Ｗ及ＣＤ１０３ａ＋ＤＣ经落新妇昔预处理后对Ｔｒｅｇ细胞诱生的影响，并初步探讨落新妇巧调控ＣＤ１０３ａＤＣ细胞活性的分子机制。［方法１首先采用ＤＳＳ诱导肠炎小鼠，流式细胞术（ＦＣＭ）检测经落新妇巧处理前、后，肠炎＋３ａＤＣｒｅ细胞的频率－小鼠脾脏、肠道ＣＤ１０及Ｔｇ，分析二者的相关性。检测ＤＳＳ肠炎小＋－－－－－－鼠ＣＤ１０３ａＤＣ表面Ｂ７Ｈ１、ＣＤ％、正１５Ｒａ的

5、表达及正１０、ＴＧＦＰ、比１２、正６、正ＩＰ、＋ＴＮＦ－ａ的分泌。并Ｄ１０ＤＣ利用不同浓度落新妇昔体外直接刺激脾脏单细胞悬液，分析Ｃ３ａ＋表面分子的表达及相关细胞因子的分泌。在此基础上，流式细胞术分选ＣＤ１０３ａＤＣ、＋ＣＤ１０３ａＤＣ，分别用落新妇昔处理后，检汲！｜ＣＤ１０３ａＤＣ、ＣＤ１０３ａＤＣ表面ＣＤ８６、Ｂ７Ｈ１－－的表达，酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清忙１〇、ＴＧＦＰ的含量。另外，将不同浓度＋＋落新妇巧刺激后的ＣＤ１０３ａＤＣ、ＣＤ１０３ａＤＣ与ＣＤ４Ｔ细胞共解育，检测Ｔｒｅｇ细胞的频

6、＋ｅｓ－率。流式细胞术和ＷｔｅｒｎＢｌｏｔ方法分别检测，经落新妇巧刺激的ＳＧＣ７９０１细胞和ＣＤ１０３ａＤＣ，胞内ＳＴＡＴ３分子憐酸化位点（ｐＹ７０５及ｐＳ７２７）的表么最后分析ＳＴＡＴ３信号被特＋３ａＤＣ细胞表面ＣＤ８６－－异性抑制后，ＣＤ１０、Ｂ７Ｈ１表达及正１０、比Ｉｐ分泌的变化。扬州大学硕±学位论文２＿＿【结果】＋－ＤＳＳ－肠炎小鼠脾脏３ａＤＣ的表达均高于对照组ＤＳＳ、肠道ＣＤ１０；落新妇巧可Ｗ增加＋＋＋肠炎小鼠肠道ＣＤ１０３ａＤＣ及Ｔｒｅｇ细胞（ＣＤ４ＣＤ２５Ｃｍ２７）的频率。落新妇

7、巧腹腔注射的＋－－－ＤＳＳ３ａＤＣ的Ｂ７ＨＦ－忙－－肠炎小鼠ＣＤ１０１、正１０、ＴＧＰ表达上调，口、正６、比１０分６ＩＬ－ＴＮＦ－、１５Ｒａ、ａ。泌减少，ＣＤ８表达无明显变化落新妇巧体外刺激牌脏单细胞悬液，＋－－ＣＤ－１、Ｔ－－ＬＤ％、１０３ａＤＣ的Ｂ７Ｈ１、忙０ＧＦＰ表达上调，正１２、６、正１０分泌减少，Ｃ＋－５ＲｃｕＴＮＦ－ａ表达无明显变化Ｌ１。落新妇巧体外刺激，ＣＤ１０３ａＤＣ表面ＣＤ８６的表达无Ｂ７Ｈ－－－１、正、ａ７０、明显变化，而１０ＴＧＦＰ表达上调，而ＣＤ１０３ＤＣ的ＣＤ％、ＢＨ

8、１、止１＋ＴＧＦ－表达无明显变化。经落新妇巧预处理的小鼠ＣＤ１０３ａＤＣ可诱导Ｐ＋＋＋ＴｒｅＣＤ４ＣＤ２５Ｆｏｘ３ＣＤａ？ｒｅｇ巧细胞的生成，而１０３ＴＣ共鹏育的Ｔ频率无明显变化。落（ｐｇ＋－１ＤＣ细胞内ＳＴＡＴＹ显上新妇昔刺激ＳＧＣ７９０１及ＣＤ０３ａ３分子（