红芪多糖对老年痴呆细胞模型蛋白表达谱影响的研究

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1、：Ｒ２８５分类号．５密级：公开Ｗ續乂掌专业学位研究生学位论文红茂多糖对老年痴呆细胞模型蛋白表达谱论文题目（中文）影响的研究ａ－ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＨｅｄｙｓａｒｉｒａｄｉｘｐｏｌｙｓａｃｃｈ论文题目（外文）ｒｉｄｅｏｎｒｏｔｅｉｎｅｘｒｅｓｓｉｏｎｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆｐｐｐ，ｄＡｌｚｈｅｉｍｅｒｓｄｉｓｅａｓｅｃｅｌｌｓｍｏｅｌ研究生姓名李菲学位类别临床医学专业学位专业学位领域中西医结合临床学位级别硕±校内导

2、师姓名、职称程卫东教授校外导师姓名、职称论文工作起止年月２０１３年４月至２０１５年１月论文提交日期２０１５年３月论文答辩日期２０１５年５月学位授予日期校址：甘肃省兰州市原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果，。学位论文中凡引用他人己经发表或未发表的成果、数据、观点等均己明确注明出处。除文中己经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和

3、集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：日期；关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或一与该论

4、文直接相关的学术论文或成果时，第署名单位仍然为兰州大学。本学位论文研究内容：ｚ奇Ｗ公开ｖｃ□不宜公开，已在学位办公室办理保密申请，解密后适用本授权书。＂＂一（请在Ｗ上选项内选择其中项打Ｖ）—■—ｆＩ，＞種＾东！二论文作者签名；等非导师签名：印ｊ＾．日期；、ｒｖ２＾：＞作、ｒ日期红巧多糖对老年痴呆细胞模型蛋白表迭谱影响的研究中文摘要ｚｈｅｉ目的：研究红巧多糖对老年性痴呆（Ａｌｉｍｅｒｓ出ｓｅａｓｅＡＤ）细胞模型存活，率及蛋白表达谱的

5、影响。方法：１．通过ＭＴＴ法测定不同浓度红巧多糖（Ｈｅｄｙｓａｒｉｒａｄｉｘｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ｐＨＲＰ－）作用ＳＨＳＹ５Ｙ类神经细胞后对其产生的毒性作用，测定不同浓度ＨＲＰ对５ｉＭＡ导的ＡＤ细胞模型的保护作用，并于倒置相差显微镜下观察各组｜Ｐｗ２诱－－ＳＨＳＹ５Ｙ细胞的形态学变化。２．建立ＳＨＳＹ５Ｙ细胞蛋白的双向电泳体系，使用丙酬沉淀法对蛋白进行纯化并在最优化的聚焦条件下使用双向凝胶电泳分离纯－化后的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞蛋白，银染后扫描凝胶获得蛋白图谱。３．

6、按照摸索晦条件，设置对照组、５ｌＭＡ３＾４２模型姐和ＨＲＰ药物干预组，提取每组８拓８￥５￥细胞的＾｜总蛋白，对所得的蛋白图谱通过ＰＤＱｕｅｓｔ８．０软件分析找出蛋白图谱的差异蛋白点，进行质谱鉴定。结果．红／ｍｌ２．５，５，１０ｖＩＡｗ２均能成：１茂多糖的无毒剂量范围为讀（Ｖｇ；叫Ｐ功诱导复制ＡＤ细胞模型；与心）模型组相比０４０，８０ｌ／ｍｌＨＲＰ，２，＾ｇ药物姐细－胞存活率明显升高。２．采用两丽沉淀法纯化ＳＨＳＹ５Ｙ类神经细胞蛋白，最优化的聚焦条件下进行蛋白

7、分离－ＳＹ５Ｙ，成功建立了ＳＨ类神经细胞蛋白双向电泳条－件，得到蛋白图谱。３厮得２ＤＥ图谱通过ＰＤＱｕｅｓｔ８．０软件分析结果如下：对照组蛋白点为９１２±２３个，模型姐蛋白点为８１０±１１个，ＨＲＰ药物组组蛋白点为８７１±４１个，与模型组比较，药物近有２２个蛋白点的表达发生了明显变化＜（尸０．Ｍ）４ａ、，采用质谱方法成功鉴定个蛋白质，分别是胆碱激酶Ｒａｇ调节－２－ｄｅ蛋白复合体ＬＡＭＴＯＲ１、转录因子蛋白ＡＰｌｔａ和铁蛋白。结论：红巧多糖对ＡＤ细胞模型存活率下降具有

8、明显保护作用，其机制可能ａ－－ｄｅ与影响胆碱激酶ａ、Ｒｇ调节蛋白复合体ＬＡＭＴ０Ｒ１、转录因子蛋白ＡＰ２ｌｔａ和铁蛋白的表达有关。：红茂多糖关键词，老年痴呆细胞模型，双向凝胶电泳，差异蛋白点，铁蛋白ＩＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＨｅｄｓａｒｉｒａｄｉｘｏｌｓａｃｃｈａｒｉｄｅｏｎｒｏｔ：ｅｍｙｐｙｐ＇ｅｘｒ的ｓｉｏｎｒｏｆｉｌｉｎｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒｓｄｉｓｅａｓｅｃｅｌｌｓｍｏｄｅｌｐｐｇＡｂｓｔ巧ｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｓ