探析芳樟叶中有效成分的提取及其生物活性研究

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1、厦门大学硕士学位论文芳樟叶中有效成分的提取及其生物活性研究姓名：苏远波申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：李清彪20060801摘要樟树(Cinnamomumcamphora)是我国生产天然香料芳香油的主要树种，用途广，经济价值高。近年来，通过组培、扦插等技术培育出纯种芳樟，大大提高樟树资源的经济价值。但由于对芳樟废弃物的资源化研究力度不够，忽视了许多有药用价值的化学成分如生物碱、多糖和内酯类等化合物的开发利用，造成芳樟资源浪费严重，为使芳樟资源发挥出最好的社会效益和经济效益，有必要改进和发展芳樟有效成分的提取工艺以及寻找其中有生物活性的有效成分。近年来，超声波辅助提取技术已被广泛应用于

2、农业、食品和化工医药等领域。由于其提取速率快、溶剂用量少、提取率高，使之成为天然产物提取的有利工具。本论文首次将超声波技术应用于芳樟叶有效成分的提取等研究工作，效果较好，具有较高的实际应用价值。利用电感耦合等离子体质谱(ICP．1ⅥS)，在芳樟叶中共检测出14种常量和微量无机元素。通过化学成分预试验，发现芳樟叶中化学成分种类丰富，其中不乏有抗肿瘤研究的热点物质，如内酯类、生物碱类以及多糖等。运用正交试验法优化超声提取工艺，主要考察乙醇浓度、萃取时间和料液比对芳樟叶内酯类物质提取的影响。结果表明，超声提取的最佳工艺条件是：用95％乙醇浸泡24h，超声萃取15rnin，料液比l：20。采用系统溶剂

3、法结合MTT抗癌试验，对芳樟叶乙醇提取物进行分离和活性筛选。结果表明，石油醚部份EP对体外培养的人体肺癌95一D细胞、人口腔表皮样癌KB细胞和肝癌HepG2细胞的抑制作用最强，其IC50值分别为128pg·mL“(95．D)，47．9肛g’mLl(KB)，97．199’mLl(HepG2)。以MTT抗癌试验为指导，利用硅胶柱层析技术对石油醚部份EP进一步分离纯化。实验表明，分段洗脱组分Ep-S1的IC50值247lag·mLl(95-D)，llllag·mLl(r-m)均小于其余洗脱组分，而EP-s2的ICso值90．9嵋·mLl(HepG2)小于其余洗脱组分。而在9个梯度洗脱组分中，EP—G

4、5的抗癌活性最高，其IC50值分别为68．5lttg·mL。1(95一D)，31．5I．tg·mL。1(KB)，57．91,tg·mLl(HepG2)，并小于石油醚部份EP的IC50值；EP．G4也体现出一定的体外抗癌活性，其IC50值与EP．G5接近；而其它洗脱组分的体外抗癌活性均低于石油醚部份EP。摘要用滤纸片法研究芳樟叶各提取物的抑菌活性，结果表明，石油醚部份EP的抗菌活性最高，其最低抑制浓度分别为0．5g-Lo(金黄色葡萄球菌)、0．6g-L。1(大肠杆菌)、0．1g．L。(啤酒酵母)和0．2g·L1(粘红酵母)均小于其余提取部份。由FR．AP法和DPPH法测定抗氧化活性，结果表明，芳

5、樟叶提取物乙醇提取物的低极性部份总体上比高极性部份表现出较强的抗氧化活性，其中，以氯仿提取部份的抗氧化作用最强，其FRAP值为1．39mmol／L，DPPH去除率达55．9％。关键词：芳樟；有效成分；超声波；提取；生物活性IIABs，rRACq"ABSTRACTIthasbeenknownthatCinnamomumcamphorawasanimportantplantthatcouldproducenaturalflavorandaromaticoilsinChinaforalongtime．Inrecentyears，ithasbeenreportedthatpurebredCinnamo

6、mumcamphoracouldbesuccessfullycultivatedbytissueculture，whichsignificantlyenhancedthevalueofCinnamomumcamphora．However,considerablecomponentsinCinnamomumcamphora,e．g．alkaloid，amyloseandlaetones，whichhadpharmacologicalmerit，havereceivedlittleattention．ToutilizeCinnamomumcamphoratreesmorereasonablyand

7、economically，itisimportantthatthetechniquesforextractingpharmacologicalcomponentsshouldbeimprovedandmoreactivecomponentsshouldbeexploited．Ultrasonic-assistedextractiontechnologyhasbeenappliedtoseveral