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时间:2019-03-12
《HBV感染与NAFLD发生的流行病学及细胞功能研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、分类号:R446单位代码:10343学号:151004719硕士学位论文论文题目:HBV感染与NAFLD发生的流行病学及细胞功能研究研究生姓名:王冰倩学科专业:临床检验诊断学类型:学术型指导教师:吕建新二O一八年五月温州医科大学硕士学位论文论文题目:HBV感染与NAFLD发生的流行病学及细胞功能研究答辩委员会主席:丁焕根教授答辩委员会成员:申志发教授谭国强副研究员论文答辩日期:2018年5月27日温州医科大学硕士学位论文缩略词表缩略词英文全称中文全称NAFLDnonalcoholicfattyliverdisease非酒精性脂肪性肝病HBVHepatitisBvirus乙型肝炎病
2、毒非变性梯度聚丙酰胺凝胶BN-PAGEbluenativepage电泳十二烷基磺酸钠-聚丙酰胺SDS-PAGESodiumdodecylsulfatepage凝胶电泳ATPadenosinetriphosphate三磷酸腺苷ROSreactiveoxygenspecies活性氧族MMPMitochondrialmembranepotential线粒体膜电位OXPHOSoxidativephosphorylationsystem氧化磷酸化系统OCROxygenconsumptionrate氧耗量HBxHepatitisBvirusXprotein乙型肝炎病毒X蛋白NBTnitrot
3、etrazoliumbluechloride氯化硝基四氮唑蓝5-bromo-4-chloro-3'-indolyphosphatep-5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸对甲BCIPtoluidine苯胺NACN-acetyl-L-cysteineN-乙酰半胱氨酸HBsAghepatitisBsurfaceantigen乙肝表面抗原HCVhepatitisBsurfaceantigen丙型肝炎病毒温州医科大学硕士学位论文目录中文摘要…………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………5前言…………………………………………………………10材料与
4、方法…………………………………………………………12结果…………………………………………………………31分析与讨论…………………………………………………………37参考文献…………………………………………………………39致谢…………………………………………………………43综述…………………………………………………………44独创性声明…………………………………………………………61温州医科大学硕士学位论文HBV感染与NAFLD发生的流行病学及细胞功能研究中文摘要研究背景:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD):指除酒精和其他明确的对肝脏有损伤的因素所导致的肝细胞内脂肪过度累积,与机体胰岛素
5、抵抗和遗传易感性有着密切关系,是一种获得性代谢应激性肝脏损伤。乙型肝炎病毒简称乙肝病毒,属于嗜肝DNA病毒科。HBV基因组是部分环状双链DNA,编码四种乙肝病毒蛋白能够翻译成包括蛋白质C、X、P和S四种蛋白质。HBV基因组编码的四种蛋白中,X蛋白质(HBx)是一种多功能调节因子,参与不同的细胞内信号转导途径和调控基因转录的功能,对HBV感染人体肝脏细胞起着重要的作用。现阶段的研究表明,慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的患病率之间存在着相关性,但HBV感染造成NAFLD的机制尚不明确。在本课题研究中,发现HBV感染与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的
6、发生之间存在着重要的联系。本课题研究对HBV感染者和HBV未感染的女性人群中进行统计学分析后,发现在经过年龄校正后,HBV感染者的脂肪肝发病率(16/152,10.5%)与非HBV感染者相比,没有显著差异(OR=0.656;95%CI:0.379,1.134;P=0.131)。大量研究证实HBx蛋白在脂肪肝形成过程中发挥着重要作用,而HBx蛋白是HBV感染人体后的关键调节因子。因而在本课题的研究中,使用含HBx基因的慢病毒质粒pCDH构建HBx蛋白稳定表达的细胞系Huh7-HBx和MIHA-HBx,间接研究HBV感染后对肝细胞的正常生理功能的影响。通过研究发现,HBx转染后细胞相
7、比于对照组细胞,具有较高的氧耗率,ATP合成能力和线粒体膜电位水平,这表明HBx转染后细胞内线粒体功能发生明显改变。HBx转染后的细胞相对于对照组的细胞有着更强的线粒体功能。线粒体除了提供机体运转所需要的ATP外,同时线粒体还是ROS的主要来源。在本研究中也发现HBx转染后细胞ROS水平显著升高。同时伴随着ROS水平升高,细胞内产生了更多和更大的脂滴。这表明线粒体ROS的生成与细胞内的脂滴累积之间存在着一定的关联,ROS可能是调节脂肪酸代谢的信号。当用NAC处理后,HBx转染的细
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