磷脂酶a,1催化水解大豆浓缩磷脂的研究

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1、大连理工大学硕士学位论文磷脂酶A<,1>催化水解大豆浓缩磷脂的研究姓名：王大海申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：于才渊20080609大连理工大学硕士学位论文摘要磷脂是构成细胞膜的主要成分之一，是重要的生命基础物质。磷脂又是一种天然两性表面活性剂。由于其表面活性和生理活性，磷脂广泛应用于食品、医药、化妆品、农业等领域。随着油脂科学、病理学、药理学、营养学等科学的发展，磷脂的改性受到越来越多的关注，其中又以反应条件温和，副产物少，酶作用部位准确的酶法改性磷脂最具意义和发展潜力。本文以大豆浓缩磷脂为原料，以磷脂酶A。为酶试剂对大豆浓缩

2、磷脂进行水解改性研究。对磷脂酶A。水解大豆浓缩磷脂的反应体系进行了选择。研究发现，均质转速的不同，水解效果差别显著；非静置反应条件下比静置反应条件下，磷脂水解效果显著提高；有机溶剂存在条件下，反应速率较快，水解产物酸值比水相反应条件下略高，水相反应条件下同样可以达到较好的水解效果，流程简化且产物安全性好；随着钙离子浓度的增加，酸值逐渐减小，磷脂酶A。没有表现出对钙离子浓度的依赖性。确定了磷脂酶A，催化水解大豆浓缩磷脂的反应体系为：均质转速1000r／min，不添加钙离子的非静置水相反应体系。通过单因素实验，研究了加酶量，底物比(v／w)，

3、反应温度，反应时间对磷脂水解的影响。确定了加酶量400～600pl，底物比10--一14，反应温度35～45℃，反应时间9～11h的范围内，水解效果较好，产物酸值较高。在单因素实验基础上，基于响应面分析法，以酸值为磷脂水解的响应指标，采用Box-Behnken中心组合实验设计，建立的二次回归方程为：AV=127．1+1．975X。-b2．075X：+0．808334X。+1．375X‘一1．09167X。2—4．79166X22—5．26667X32—2．04166池24-0．449989X。X。+0．699998X。X3一O．125X。

4、)(4+0．299998X。X3一O．824999X。墨--0．275003X3)【4。分析结果显示底物比和反应温度对酸值的影响最为显著，因素影响显著性顺序：底物比>反应温度>反应时间>加酶量。研究了任意两因素的交互作用对磷脂水解的影响。实验范围内得到最佳的工艺条件是：加酶量590pi，底物比12．4，反应温度40．4℃，反应时间10．3h，此时预测值为128．9mgKOH／g，该条件下验证实验得到的酸值为128．5mgKOH／g，与预测值拟合较好，该回归方程为磷脂酶A。水解大豆浓缩磷脂提供了一个合适的模型。关键词：磷脂；磷脂酶A。；水解

5、；酸值；响应面磷脂酶Al催化水解大豆浓缩磷脂的研究PhospholipaseAl—catalyzedHydrolysisofSoybeanPhospholipidsAbstractPhospholipidsareintegralcomponentsofbiomembranes．Intensivestudieshaveshownthatfunctionsofphospholipidsaremultifold，ubiquitousandfundamentalforlife．Beingnaturalsurfactantsofamphiphili

6、cmoleculesandphysiologicalfunctions，commercialphospholipidsarewidelyusedinfoods，pharmaceutical，cosmetic，agricultureandotherindustrialfields．Rapidprogressinlipidbiochemistry，pathology，pharmacologyandnutriologyhasbroughtmoreandmoreattentiontophospholipidsmodification．ItiSbe

7、lievedthatenzymaticmodificationofphospholipidswillbeapotentialandpromisingchoicebecauseofitsuniqueadvantagessuchasmorespecificreaction,milderreactioncondition，lessby—productsandlessenvironmentalpollution．PreparationoflysophospholipidsbyphospholipaseA1·catalyzedhydrolysiso

8、fsoybeanphospholipidswa．sinvestigated．Reactionsystemwasinvestigatedincludinghomogenizingrate．sti