桑叶多糖提取分离纯化工艺的研究及其结构性质的初探

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1、⑧天率大謦硕士学位论文学科专业:化学工程作者姓名:张琳华指导教师:高瑞昶副教授L卯,-7一S,p工浦—L芒刍ZⅡ已≈^卜盯白摘要现代药理研究表明,桑叶多糖对四氧嘧啶型糖尿病大鼠有明显的治疗作用,因此从天然桑叶提取物中分离、纯化得到桑叶多糖并研究其结构性质,对研制出治疗糖尿病的新药具有重要的学术意义和实用价值。首先,本文对桑叶多糖的提取、分离和纯化工艺进行了系统研究。对比了水、稀酸、稀碱3种提取剂对桑叶多糖的提取效果,结果表明.以水为提取剂提取量较高且多糖未发生水解;同时,采取正交实验方法,分别优化了桑叶

2、多糖的水提取和醇沉分离的工艺参数,得出了桑叶多糖的最佳水提醇沉分离工艺;然后,本文考察了大孔吸附树脂在不同条件下对桑叶多糖提取液的多糖及色素的吸附、洗脱性能,实验研究表明,在酸性条件下大孔吸附树脂对桑叶多糖色素的去除效果明显;在此基础上,本文研究了采用葡聚糖凝胶过滤的方法纯化桑叶多糖,相继用G一50和G-200凝胶过滤进行桑叶多糖的纯化,最终得到了一种均一组分的桑叶多糖。其次,本文考察了生物酶法和超声技术对桑叶多糖的提取效果,研究表明,生物酶法的桑叶多糖提取量大于常规方法,而超声方法的桑叶提取物中多糖含

3、量较常规方法略高。另外,本文探讨了桑叶多糖的分级醇沉效果和乙醇沉淀次数对多糖含量的影响:考察了Savage法除蛋白对多糖及蛋白含量的影响:进行了桑叶多糖灰份的测定和去除。研究表明,桑叶多糖提取物中多糖与蛋白结合紧密,并且多糖粗提物中含有大量的无机小分子杂质。最后,本文对纯化的桑叶多糖进行了溶解度、纯度等理化性质的检验以及结构的初步探索。考察了桑叶多糖含量的测定方法,对纯化的桑叶多糖进行了紫外及红外光谱分析,通过薄层层析法测定出桑叶多糖的单糖组成有葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,通过凝胶渗透色谱法确定了纯化的桑

4、叶多糖的数均分子量为3.1×104,重均分子量为4.3×104。本文的研究结果对于开发桑叶多糖作为一种治疗糖尿病的新药具有重要的理论和实际意义。关键词:桑叶多糖,提取分离,纯化,性质检验,结构初探AbstractTotalpolysaccharidefromMulberryleaves(TPM)candecreasebloodsugarandcureAlloxan-inducedDiabeticMiceaccordingtOmodempharmacologyresearchTherefore,ithas

5、greatvaluetoextract,separate,purlfyTPMandstudyitscorrelativecharacterstodevelopanewkinddrugincuringdiabetes.Detailedstudiesofextracting,separatingandpurifyingTPMarecarriedoutinthispaper.Comparedbytheeffectof3methodsinextractingTPM,itisfoundthatusingwater

6、assolventisbetterthandilutedacidoralkali.Then,optimalparametersofextractingTPMbywaterandseparatingitbyethanolprecipitationarerespectivelygotthroughorthogonalexperiments.Afterstudyingmacroporousresin’Sabsorptionanddesorptionforpolysaccharideandpigmentofmu

7、lberryleaves’waterextract,thepigmentremovalconditionisestablished.Furthermore,onesortofhomogeneouspolysaccharidefrommulberryleavesisgotbyusingG·-50andG--200Sephadexgelfiltrationoneaftertheother.Atthesametime,somenewmethodsofextractingTPMsuchasusingenzyme

8、andultrasonicarealsotriedinthispaper.Inaddition,wediscusstheeffectofstepwiseadditionofethanolandethanolprecipitatingtimestopolysaccharidecontent.EffectofremovingproteinbythemethodofSavagetopolysaccharideandproteincontentis

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