脊髓背角Caveolin-1-TLR4-NR2B信号通路参与糖尿病神经病理性疼痛机制研究

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1、温州医科大学硕士学位论文分类号：R614单位代码：10343学号：151002370硕士学位论文论文题目:脊髓背角Caveolin-1-TLR4-NR2B信号通路参与糖尿病神经病理性疼痛机制研究研究生姓名：贾改丽学科专业：麻醉学类型：学术型指导教师：曹红二O一八年月温州医科大学硕士学位论文论文题目:脊髓背角caveolin-1-TLR4-NR2B信号通路参与糖尿病神经病理性疼痛机制研究论文评阅人：答辩委员会主席：楼燕勤教授美国橙县海岸纪念医疗中心答辩委员会成员：林丽娜教授温州医科大学附属一院林函主任医师温州医科大学附属二院论文答辩日期：2018年5月18日目录温州医科大学

2、硕士学位论文一、缩略词表………………………………………………………(1)二、中文摘要………………………………………………………(2)三、英文摘要………………………………………………………(5)四、前言………………………………………………………………(8)五、材料与方法………………………………………………………(10)六、结果………………………………………………………………(19)七、分析与讨论………………………………………………………(29)八、结论………………………………………………………………(33)九、参考文献…………………………………………………………(34)十、

3、致谢……………………………………………………………(38)十一、综述……………………………………………………………(39)十二、独创性声明……………………………………………………(46)温州医科大学硕士学位论文缩略词表缩略词英文全称中文全称Cav-1Caveolin-1小凹蛋白-1DNPDiabeticneuropathicpain糖尿病神经病理性疼痛NR2BN-methyl-D-aspartatereceptor2BsubunitN-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基T2DMType2DiabetesMellitus2型糖尿病CNSCentralnervoussysterm

4、中枢神经系统CCIChroicconstrictiveinjury慢性结扎损伤STZStreptozotocin链脲佐菌素MWTMechanicalwithdrawalthreshold机械缩足反射阈值TWLThermalwithdrawallatency热缩足反射潜伏期WBWesternblot免疫印迹PBSPhosphatebufferedSaline磷酸盐缓冲液PMSFPhenylmethanesulfonylfluoride苯甲磺酰氟SDSSodiumdodecylsulfonate十二烷基磺酸钠APAmmonimsulphate过硫酸氨TEMEDN,N,N',N

5、'-TetramethylethylenediamineN,N,N',N'-四甲基乙二胺TrisTris(Hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷GFAPGliafribrillaryacidicprotein胶质纤维酸性蛋白1温州医科大学硕士学位论文脊髓背角Caveolin-1-TLR4-NR2B信号通路参与糖尿病神经病理性疼痛机制研究中文摘要目的：探讨脊髓背角Caveolin-1-TLR4-NR2B信号通路是否参与大鼠II型糖尿病神经病理性疼痛（DNP)的形成与发展。方法：雄性SD大鼠（120-150g）高脂高糖饲料喂养8周配合小剂量链佐脲

6、菌霉素（STZ）注射建立II型糖尿病神经病理性疼痛（DNP）模型，血糖≥16.7mmol/L的大鼠归为糖尿病大鼠（D组），根据机械缩足阈值（Mechanicalwithdrawalthreshold，MWT）和热缩足反射潜伏期（Thermalwithdrawallatency，TWL)是否降至基础值85%以下分为糖尿病神经病理性疼痛（DNP）大鼠和糖尿病非疼痛大鼠（PL组）。将DNP大鼠随机分为3组，每组24只：DNP组、DNP+cav-1抑制剂daidzein（DD）组、溶剂对照组（SC）。DD组和SC组分别皮下给予daidzein(0.3mg/kg)和10%DMSO，

7、每日一次，持续2周。另取24只SD大鼠作为空白对照组（N组），普通饲料饲喂。在DD组、SC组连续皮下给药的第3、7、14天，测定各组大鼠TWL、MWT，各组随机取8只大鼠生理盐水灌注后处死，其中取5只大鼠L4-6脊髓腰膨大组织提蛋白，用免疫印迹方法检测大鼠脊髓中cav-1、p-cav-1、TLR4、p-NR2B的表达情况，另外三只用于石蜡包埋，使用免疫组化技术检测相应蛋白的细胞定位。结果：1.血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数改变情况：与N组大鼠相比，D组大鼠连续8周高脂高糖饲喂后血糖升高但未达到糖尿病诊断标准即血糖≥16.7mmo