糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓背角细胞凋亡及相关蛋白表达的变化

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1、目录IIIIIIIIIIIIIIIIIflY2397945中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5研究论文糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓背角细胞凋亡及相关蛋白表达的变化前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·12附图

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”22讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·23结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·26综述神经病理性疼痛的病因及治疗进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36中文摘要糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓背角细胞凋亡及相关蛋白表

3、达的变化摘要目的：通过注射Streptozocin制备糖尿病大鼠模型，判断出现疼痛异常症状即糖尿病周围神经病变后，不同时间点观察脊髓背角神经细胞的凋亡变化及特异性标志蛋白，胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)和Caspase．3的改变，分析其变化规律，为认识神经病理性疼痛(Diabeticneuropathypain，DNP)发病机理及临床治疗提供帮助。方法：健康成年雄性SD大鼠100只，6N龄，体重1509-～1709，禁食12d'时后，随机选择30只大鼠作为正常对照组，另70只大鼠腹腔注射Streptozocin(STZ，50mg

4、／kg)，制备糖尿病大鼠模型，注射STZ一周以后，采尾静脉血测试随机血糖，随机血糖>16。7mmmol／L的大鼠，为糖尿病造模成功大鼠。两周后，采用VonfreyHairs法测定糖尿病大鼠的机械刺激缩足阈值(pawwithdrawalthreshold，PWT)，将PWT小于49的大鼠作为糖尿病神经病理性疼痛大鼠(DNP)进行研究。对照组30只大鼠用同等体积的生理盐水代替STZ腹腔注射。分别于注射STZ后4、6、8周每组各选lO只大鼠，腹腔注射1％戊巴比妥纳40mg／kg麻醉后，解剖大鼠，取Ll-5节段脊髓组织。用原位末端标记法(n腿L)对凋亡细胞染色计数观察，同时用免疫组化方法对G

5、FAP染色和Caspase．3蛋白表达水平的变化进行观察，通过与对照组动物比较和不同时间点的观测指标进行统计分析，揭示糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓背角神经细胞凋亡变化过程及特异性标志蛋白GFAP的表达变化规律。结果：1应用STZ腹腔注射法造模的大鼠，一周后70只大鼠中有52只糖尿病造模成功(占75％)。造模成功的糖尿病大鼠经Vonfreyhairs法筛选出的30只糖尿病性疼痛大鼠，与对照组大鼠比较，4、6、8周时随机血糖显著升高(氏O．05)、缩足反应阈值显著降低(氏O．05)。2TUNNEL染色观察脊髓背角神经元凋亡变化，与对照组相比较，模型组大鼠凋亡细胞数量在4、6、8周时均显著

6、增多(氏O．05)，并且在观中文摘要察点内，随时间延长凋亡细胞数目呈逐渐增多的变化趋势。3脊髓背角GFAP表达变化：与对照组相比较，第4、6、8周模型组大鼠脊髓背角细胞GFAP平均光密度值显著升高(氏O．05)，并随时间延长，有表达增高的趋势。4脊髓背角Caspase．3表达水平观察：与对照组相比，模型组4、6、8周时caspase．3表达水平明显增高(尸

7、痛；脊髓背角；GFAP；TUNNEL；caspase．3英文摘要StudyontheapoptosisandexpressinglevelsofCaspases··3andGFAPinspinaldorsalhorncellsfromthediabeticneuropathypainmodelratsABSTRACTObjectives：DiabeticratsmodelweremadebyintraperitonealinjectionSTZ．Whent