黄芩苷双向调控破骨细胞分化及功能

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1、分类号：R6单位代码：10343学号：151002446硕士学位论文论文题目:黄芩苷双向调控破骨细胞分化及功能研究生姓名：鲁轩源学科专业：外科学（骨外科）类型：学术型指导教师：钱宇二O一八年五月温州医科大学硕士学位论文论文题目:黄芩苷双向调控破骨细胞分化及功能答辩委员会主席：朱麟勇教授华东理工大学答辩委员会成员：杨雷教授温医大二院洪盾教授台州医院论文答辩日期：2018年5月27日2温州医科大学硕士学位论文目录1．英文缩略词中英文对照表……………………………………………42．论文摘要中文摘要………………………

2、…………………………………5英文摘要…………………………………………………………63．论文正文前言………………………………………………………………8材料与方法……………………………………………………10结果……………………………………………………………22分析与讨论……………………………………………………30小结……………………………………………………………31参考文献………………………………………………………314．综述及参考文献……………………………………………………355．学位论文独创性声明……………

3、…………………………………503温州医科大学硕士学位论文缩略词表英文缩写英文全称中文全称AnnexinV-FITCAnnexinVfluoresceinisothiocyanate膜联蛋白V异硫氰酸荧光素ANOVAOne-wayanalysisofvariance单因素方差分析DMEMDulbecco'smodifiedEagle'smedium达尔伯克改良伊格尔培养基DMSODimethylsulfoxide二甲亚砜ECLElectrochemiluminescence电化学发光FBSFetalBovin

4、eSerum胎牛血清MMPMatrixmetalloproteinase基质金属蛋白酶MTTassay4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphen3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，yl-2-H-tetrazoliumbromideassay5-二苯基四氮唑溴盐法ODOpticaldensity光密度PBSPhosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液SDSSodiumDodecylSulfonate十二烷基磺酸钠TBSTTrisBufferedSalinewithT

5、ween含Tween的Tris碱缓冲液TRAPTartrate-resistantacidphosphatase抗酒石酸酸性磷酸酶SPSSStatisticPackageforSocialScience社会科学统计软件4温州医科大学硕士学位论文黄芩苷双向调控破骨细胞分化及功能背景：骨质疏松是一种常见的老年性骨骼疾病，主要是由于成骨细胞活性降低或者破骨细胞过度激活所引起。目前的主要治疗策略是通过抑制破骨细胞来纠正骨代谢失衡来达到治疗目的。但由于药物的副作用限制了这些药物的长期使用。而已有的研究表明有些中药单体

6、可以通过抑制破骨细胞分化成为治疗骨质疏松症的药物，而中药单体黄芩苷在破骨细胞的分化及吸收功能中的作用并不清楚。目的：本研究的目的是探索黄芩苷对破骨细胞分化及骨吸收功能上的影响以及机制，并在动物模型中进一步验证其作用。方法：1.通过MTT实验来评估黄芩苷对破骨细胞前体细胞增殖的影响。运用酶标仪进行吸收值的检测，在570nm的波长处检测吸收值（OD570nm）。2.通过破骨细胞分化实验来检测黄芩苷对破骨细胞分化的影响。运用TRAP染色来观察破骨细胞分化的情况，并进行统计。3.通过骨片吸收实验来检测黄芩苷对破骨细

7、胞骨吸收功能的影响。运用扫描电镜来观察骨片被破骨细胞吸收的情况并进行统计。4.用蛋白质印迹法评估黄芩苷对破骨细胞分化相关信号通路的影响。5.在脂多糖诱导的颅骨骨溶解模型中评估黄芩苷对破骨细胞的影响。结果：我们发现，低浓度的黄芩苷（0到1μM）具有促进破骨细胞分化的作用，并且可以激活MAPK(ERK)信号通路，以及下游的c-Fos和NFATc1的活性。当黄芩苷浓度超过2μM时，将抑制破骨细胞的分化，并抑制MAPK(ERK)信号通路，以及下游的c-Fos和NFATc1活性，而且将促进破骨细胞前体的凋亡。进一步的

8、在体实验，同样发现了在脂多糖诱导的颅骨溶解实验中黄芩苷具有随浓度变化的对破骨细胞的双向效果，在低浓度黄芩苷时（6mg/kg）促进破骨细胞的活性，在高浓度黄芩苷时（12mg/kg）抑制破骨细胞的活性。结论：低浓度黄芩苷能促进破骨细胞的分化及骨吸收功能，而高浓度则能抑制破骨细胞的分化及骨吸收功能；其潜在的机制可能与黄芩苷双向调控ERK的活性有关。关键词：黄芩苷；骨质疏松症；破骨细胞；细胞分化5温州医科大学硕士学位论文