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《烟草t-dna插入突变体的旁侧序列扩增 毕业论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、青岛农业大学本科生毕业论文论文题目：烟草T-DNA插入突变体的旁侧序列扩增专业班级烟草09级01班姓名（学号）指导老师姓名指导老师职称硕士研究生完成时间2013年5月28日-.摘要：1关键词：1Abstract：2Keywords:2引言：3关键词：31.材料和方法41.1试验地点及时间41.2实验材料41.3实验方法41.4DNA纯度、浓度覆分子量的测定51.5结果和讨论52.TAIL-PCR52．1反向PCR62.2PCR步移72.3TAIL-PCR实验82.4制胶、跑电92.5切胶回收、纯化DNA102.5.112.5.123.小结与结论12致谢12参考文献
2、12-.烟草T-DNA插入突变体的旁侧序列扩增摘要：通过TALL-PCR技术来分离与已知序列邻近的未知DNA序列，利用3个根据已知序列设计的嵌套特异性引物分别和简并引物组合进行PCR反应，选择恰当退火温度对目标片段进行PCR扩增。通过在测序凝胶上电泳条带的比较筛选出不同的表达的基因，并回收这些ＤＮＡ片段，经扩增后作为探针，在cＤＮＡ或基因组ＤＮＡ库中扫描找到相关基因。应用TALL-PCR技术研究烟草基因功能，能够更好的推动烟草功能基因组学研究。TAIL-PCR技术作为一种使用技术简单易行，反应高效灵敏，产物特异性高，重复性好，能够在较短的时间内获得目标片段，已经在
3、分子生物学研究领域广泛应用。本文从TAIL-PCR技术原理出发，对该技术特异性引物设计、随机引物组合选择、PCR反应条件等关键性问题进行综述。TAIL-PCR是一种较为成熟的扩增T-DNA插入旁邻序列的技术，它操作相对简单，具有高效性，特异性高，应用非常广泛。关键词：TALL-PCR技术突变体旁侧序列扩增-.FlankingsequenceoftobaccoT-DNAinsertionmutantsofamplificationAbstract:throughtheTALL-PCRtechnologytoseparatetheunknownDNAsequencea
4、djacentwiththeknownsequence,using3nestedspecificprimersaccordingtotheknownsequencedesignrespectivelyanddegeneracyprimercombinationsofPCRreaction,selectionofappropriatetargetfragmentwasamplifiedbyPCRannealingtemperature.Bysequencinggelelectrophoresisbandsscreenedoutthedifferentexpressi
5、ongenes,andtherecoveryoftheseDNAfragments,amplifiedandusedasprobe,inCDNAorgenomicDNAlibraryscanningtofindrelatedgenes.StudyontheapplicationofTALL-PCRtechnologyintobaccogenefunction,canpromotethetobaccofunctionalgenomicsstudybetter.TAIL-PCRtechnologyasatechnologyissimple,reactionproduc
6、tishighsensitive,highspecificity,goodreproducibility,canobtainthetargetfragmentsinarelativelyshortperiodoftime,hasbeenwidelyusedinthefieldofmolecularbiologyresearch.ThisarticlefromtheTAIL-PCRtechnologytheory,summarizesthetechnologydesignedspecificprimer,primercombinationsselected,PCRr
7、eactionconditionsandotherkeyissues.Keywords:TALL-PCRmutant,flankingsequenceamplification-.引言：中国是世界上的烟草生产大国,烟叶总产量和总销量都在世界上占有着非常大比重，烟草也是我国重要的经济植物，烟草税收是我国财政收入重要来源之一，对我国经济建设起到了很好的推动作用，有利于我国的社会进步和发展。烟草功能基因组学的研究还没有完全开展,，对于克隆研究烟草重要功能基因具有重大的意义,但是没有相应的突变体很难取得突破性的进展。通过筛选突变体,可有望获得一系列性状特异、能稳定遗传、有
8、利用价值的
