紫杉醇联合dc疫苗对小鼠宫颈癌移植瘤影响的实验研究

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2、究生签名；；o叶导师签章；葛解≯o晦d其bEt目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文紫杉醇联合DC疫苗对小鼠宫颈癌移植瘤影响的试验研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日l』吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．11附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25综述肿瘤微环境影响肿瘤治疗的研究进展⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．27致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33中文摘要紫杉醇联合DC疫苗对小鼠宫颈癌移植癌影响的实验研究摘要目的：采用紫杉醇和DC疫苗联合作用于小鼠宫颈癌移植瘤，观察小鼠肿瘤组织微环境里面的IL．6这一免疫抑制因子与肿瘤微环境的

4、细胞因子VEGF发生的变化，对应用紫杉醇化疗药物后能否增强DC疫苗抗肿瘤效应进行了研究和探讨。方法：1建立荷瘤小鼠模型：取宫颈癌U14细胞，在其处于对数生长期时，通过计数板计数，将浓度调整至1×106个／0．2ml，将0．2毫升细胞接种到C57BL／6小鼠身体的背部或者腹部皮下，完成接种以后的第七天展开实验。2制作DC疫苗：取宫颈癌U14细胞，通过照射丫射线将它们灭活，而后予以反复的冻融，从而获得肿瘤细胞抗原。颈椎脱位法处死未荷瘤小鼠，无菌环境下提取小鼠身上股骨，获得骨髓细胞，在rmIL．4以及rmGM．CSF诱导下进行培养，这样就能够获得小鼠骨髓来源的树突状细胞，再将树突状

5、细胞与肿瘤抗原共同培养，获得DC疫苗，流式细胞仪鉴定DC表型。3实验描述：对荷瘤小鼠予以随机分组，一共划分成4组，一组由10只组成：对照组有10只，将0．2ml的生理盐水腹腔内注射，每天注射一次，每只要注射0．2ml，持续14天；DC疫苗组10只，将DC疫苗于荷瘤小鼠的肿瘤局部注射一次，一周后重复注射一次；紫杉醇组10只，每只腹腔内注射紫杉醇0．2ml，持续注射14天，每天注射一次；DC疫苗和紫杉醇联合组10只，将紫杉醇0．2ml于荷瘤小鼠腹腔注射，一日一次，连用3天，将DC疫苗于肿瘤局部注射一次，一周后重复。称量瘤重，计算抑瘤率。4免疫组化SP法：用麦克奥迪医学图像分析软件

6、对组化结果行定量分析，用平均光密度值(OD值)检测小鼠瘤组织中VEGF、几．6的表达情况。中文摘要5分析相关的数据：采用多样本均数比较的方差分析及两两比较的S．N．K检验，数据分析采用SPSS13．0统计软件完成，以P<0．05为差异有统计学意义。结论：1鉴定DC：在倒置显微镜下观察，于培养的第七天发现细胞出现树突状突起，大部分呈悬浮状生长，通过流式细胞仪作出鉴定，CDllc+CD86+DCs纯度为89％，说明为典型成熟的DCs。2每组小鼠具体的生长状态：各组小鼠于接种U14瘤细胞后l～10天，其生长状态均良好，第15天后，对照组体重慢慢下降，活动、进食逐渐减少；紫杉醇组，用

7、药一周后，进食减少；用药二周后，出现精神萎靡，而且活动缓慢。联合组与DC疫苗组：精神状态较好，体重无明显下降趋势。3紫杉醇与DC疫苗对小鼠移植瘤的影响：在完成接种瘤细胞以后的一到十天里，各组小鼠移植瘤生长大致相同；在十一到十五天，对照组生长最快；联合组生长最慢；在十六N-十四天，对照组的生长速度明显快于其他三组，而无论是紫杉醇组，还是联合组，移植瘤都呈现缩小的趋势。从第十八天起，DC疫苗组呈现缩小的趋势，而缩小的速度最快的、表现的最明显的就是联合组。经过称重，联合组、紫杉醇组、对照组以及DC疫苗组对应的