超声微泡介导ngb基因过表达对氯化钴诱导sh-sy5y细胞缺氧损伤及对大鼠视网膜急性高眼压损伤保护的研究

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1、目录一、摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12三、论文论文一大鼠N曲基因的克隆、序列分析以及真核表达载体构建前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16翮舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32论文二超声靶向微泡破坏技术介导N曲基因对SH-SY5Y细胞转染的最优参数研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33月{J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。33材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··41论文三超声微泡介导Ngb基因过表达对氯化钴诱导的SH—SY5Y细胞缺氧损伤的保护研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43结果⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·55结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯·一⋯“⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯·57论文四超声微泡介导N曲基因过表达对大鼠视网膜急性缺血损伤的保护研究前言⋯⋯⋯⋯···⋯·⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58刖看⋯⋯⋯⋯”“”“⋯“⋯”⋯⋯⋯⋯⋯““““⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。58材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯59结果⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·60讨论⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··63结论⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯⋯65四、本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66五、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯67六、附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯70在学期间科研成绩⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82致谢⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯··83个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·84·中文论著摘要·{IlllllIllU11111111lUlllllIIIllIll

6、lllllY1893369超声微泡介导Ngb基因过表达对氯化钴诱导的SH．SY5Y细胞缺氧损伤及对大鼠视网膜急性高眼压损伤的保护研究·】J-‘!苎一刖吾随着分子生物学及生物技术的迅速发展，近年来基因治疗的基础研究与应用得到了长足的进步。在基因疗法的研究中，基因传输是成功进行基因治疗的一个关键步骤，其中靶向、非侵袭的基因输送系统因其诸多优点成为基因疗法研究中的一个热点，在临床上具有重要的潜在应用价值。虽然传统的病毒基因载体具有较高的基因转染效率，但该类方法的安全性和长期疗效受到质疑，限制了其临床应用。近几年，非病毒基因载体引起了研究者的关注

7、并得到了广泛研究。但目前的研究表明，单纯的非病毒载体基因转染率不高，导致基因治疗效果明显受限。超声靶向微泡破坏技术(Ultrasound-targetedmierobubbledestruction，UTMD)是一种靶向、高效、有广阔应用前景的非病毒基因输送新策略，其通过诱发细胞膜声孔作用，增加膜通透性，进而有效促进大分子物质的胞内传输，且可避免其他基因传输方法的副作用。在该类方法的研究中，UTMD的参数设置与优化组合对基因转染效率有至关重要的影响。本论文将对UTMD的参数进行详细分析与优化，为靶向、高效、无创的基因治疗研究提供一种可行的

8、实验方案。脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)是2000年由德国Burmester等首先发现的一种携氧球蛋白，是继血红蛋白(Hb)和肌红蛋白(Mb)之后的第三种携氧球蛋白。主要在神经元、