pm2.5暴露对大鼠清除肺炎克雷白杆菌影响及其机制

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1、中文摘要PM2．5暴露对大鼠清除肺炎克雷白杆菌的影响及其机制摘要目的：研究表明可吸入颗粒物的增加可使肺炎的住院率增加，这在老年人及儿童中尤为明显。肺炎克雷伯杆菌是条件致病茵，是老年性肺炎主要致病菌之一。本研究建立PM2．，暴露大鼠模型后予以肺炎克雷伯杆菌感染，通过检测PM2．5暴露前后大鼠临床评分、肺脏病理、BALF中细胞计数、细菌菌落计数及细菌感染率，探讨了PM2．5暴露对大鼠肺炎克雷伯杆菌感染的易感性和细菌清除率的影响；通过电镜检测大鼠气管粘液纤毛结构改变及血清中TNF．a及IL．6的含量，探讨了PM2．5暴露导致大鼠呼吸系统细菌易感性增加的机制，以期对PM2．5暴露导致的肺部感染性疾病的

2、诊治提供理论依据。方法：清洁级雄性SD大鼠86只，按随机数字表法分为4组：①空白对照组；②生理盐水+肺克感染组；③PM2．5+生理盐水组；@PM2．5+肺克感染组；肺克感染指以肺炎克雷白杆菌标准菌株悬液浓度为1．0xl05cfu／ml，以lml／kg气管内滴入。PM2．5暴露指PM2．5以30mg／kg气管内滴入。各组动物根据评分标准进行I临床评分，并分别于l天、7天处死部分动物，取材后测定相应指标。10％水合氯醛腹腔注射麻醉，股动脉放血处死动物并收集血液离心，吸取上清，应用ELASA方法检测血清中TNF．0【和IL．6的含量。取右肺中下叶，10％中性福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋，切片，HE

3、染色，观察肺组织的病理形态变化并进行评分，对整个肺左叶行支气管肺泡灌洗，取支气管肺泡灌洗液，部分送细菌培养进行细菌菌落计数，部分离心后细胞沉淀悬浮于200“l生理盐水中，应用光学显微镜进行细胞计数。并取上段气管用扫描电镜观察气管黏膜上皮的细胞构成、纤毛情况。结果：l临床评分：空白对照组、NS+肺克感染组、PM2．5+NS组署IJPM2．5+肺克感染组l天的临床表现评分中位数和四分位数间距分别为4(1)、5(2)、5(1)、7(2)；7d的临床表现评分中位数和四分位数间距分别为1(1)、5(1)、4(2)、8(4)。即1天PM2．5+肺克感染组动物的临床评分高于空白对照组(P<0．01)；中文摘

4、要而PM2．5+NS组和NS+J]砟i克感染组与空白对照组比较临床评分变化无统计差异(P>0．05)；PM2．5+肺克感染组与NS+J]O克感染组和PM2．5+NS组相比动物的临床评分变化无统计学差异(P>0．05)。7天NS+肺克感染组、PM2．5+NS组和PM2．5+肺克感染组动物的临床评分均高于空白对照组(P<0．01)，且PM2．5+肺克感染组动物的临床评分高于NS+肺克感染组和PM2．5+NS组(P<0．01)。空白对照组在第7天的临床评分较第1天下降有统计学意义(P<0．01)；NS+肺克感染组、PM2．5+NS组和PM2．5+J]市克感染组不同时间临床评分均无明显改善(P>O．0

5、5)。2死亡率的比较：空白对照组、NS+肺克感染组、PM2．5+NS组和PM2．5+肺克感染组动物的7天总死亡率分别为：O％、30％、20％、46．7％。NS+J]砟i克感染组、PM2．5+NS组和PM2．5+肺克感染组动物的死亡率明显高于空白对照组有统计学差异(P<0．0083)，且第7天PM2．5+肺克感染组动物的死亡率也明显高于NS+PM2．5组和NS+肺克感染组，差异有统计学意义(P<0．0083)；PM2．5+肺克感染组第7天动物死亡率明显高于第1天(P<0．05)，而空白对照组、NS+肺克感染组和PM2．5+NS组不同时间上动物死亡率无明显差异(P>O．05)。3肺脏组织病理学评分

6、：l天和7天时NS+肺克感染组、PM2．5+NS组、PM2．5+肺克感染组肺组织病理分级高于空白对照组，均有统计学差异(P<0．05)，且PM2．5+肺克感染组较NS+N克感染组和PM2．5+NS组病理评分明显升高有统计学意义(P<0．05)。所有组第7天时较第1天的病理分级变化均无统计学意义(P>O．05)。4电镜气道粘液纤毛的改变：PM2．5+NS组染毒1d时可见大鼠的气管纤毛呈杂乱、粘连、成束分布，摆动不良的外观，可见到其下的微绒毛。染毒7d时大鼠气管纤毛的粘连和倒伏状态更加严重，纤毛变短不规则，稀疏部分脱落，部分视野甚至纤毛缺失，可见新生的纤毛柱状上皮细胞。空白对照组大鼠气管柱状上皮纤

7、毛的结构完整排列规则。5BALF中细胞总数及分类：结果表明l天和7天时NS+PM2．5组、PM2．5+NS组和PM2．5+肺克感染组与空白对照组相LI',BALF中白细胞总数及中性粒细胞计数及比例均明显增多(P<0．05)，且PM2．5+肺克感染组BALF中白细胞总数及中性粒细胞计数及比例明显高于PM2．5+NS组*DNS+N克感染组(P<0．05)。而NS+肺克感染组、PM2．5+NS组和PM2