游离脂肪酸对thp-1巨噬细胞nalp3炎性通路的影响

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1、中图分类号墅2§：!UDC610硕士学位论文学校代码!Q§33密级公珏游离脂肪酸对THP．1巨噬细胞NALP3炎性通路的影响EffectofNALP3inflammasomesignalingpathwayinTHP-·1macrophagesinducedbyFreefattyacid作者姓学科专研究方学院(系、指导教名：付丽瑶业：临床医学向：内科学所)：湘雅二医院师：周伏喜副教授中南大学二O一三年五月答辩委员会主原创性声明IIlIIIIlUllIltlllY2425515本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研

2、究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：』垴亟日期：五13年』月坐日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中

3、国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。日期：丛年皇月盥日硕士学位论文中文摘要游离脂肪酸对THP．1巨噬细胞NALP3炎性通路的影响摘要目的：探讨NALP3炎性小体在NASH的炎症发生以及发展中的可能作用。方法：选择THP．1巨噬细胞构建体外巨噬细胞模型，用不同浓度的棕榈酸(509mol／L、1009mol／L、2009mol／L、400pmol／L)干预24h；用不同浓度的N一乙酰半胱氨酸(NAC)预处理细胞后加入高浓度的棕榈酸(400Ⅳnol／L)孵育24h。分别

4、用活性氧指示剂结合荧光显微镜及流式细胞仪检测THP．1巨噬细胞活性氧(ROS)的变化；用ELISA方法检测细胞上清液中IL一1p的浓度；用免疫荧光技术检测NALP3、caspase．1蛋白表达；用荧光定量PCR检测NALP3蛋白复合体mRNA表达水平。结果：与空白组相比，各棕榈酸组THP．1巨噬细胞内ROS增加，NALP3、caspase．1蛋白表达及其分泌IL一1p水平均增加(P

5、，同时NALP3、caspase．1蛋白表达水平，NALP3复合体mRNA水平及其分泌IL．1p的能力均降低(P

6、cedbyFreefattyacidABSTRACTObjective：ThestudywasdesignedtoinvestigatethepotentialeffectsofNALP3inflammasomeontheoccullrenceanddevelopmentofnonalcoholicsteatohepatitis．Methods：THP-1macrophageswereculturedfor24hbypalmiticacidwithvariousconcentrations(50pmol／L、100“rnol／

7、L、2009mol／L、400pmol／L)．PretreatmentoftheTHP一1macrophageswithN-acetyl—cysteineatdifferentdosesbeforepalmiticacid(4009rnol／L)cultivationfor24h．ROSproductiondeterminedbyflowcytometryandfuorescencemicroscope，TheexpressionofIL一1pweredetectedbyELISA，TheexpressionsofNALP3p

8、roteinandcaspase一1proteinwasdetectedbyimmunofluorescence，NALP3、ASC、caspase一1mRNAwasmeasuredbyReal-timePCR．Results：ComparedtotheTHP-1macrop