华蟾素注射液对人肝癌hepg——2细胞增殖及拓扑异构酶ⅱ表达的影响

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1、中图分类号密级华蟾素注射液对人肝癌HepG一2细胞增殖及拓扑异构酶II表达的影响TheEffectofCinobufaciniInjectionsonTheProliferationandExpressionofTopoIIinHepatocarcinomaHepG一2Cells计：学位论文：38页表格：4个插图：9幅指导教师：崔晓楠教授申请学位级别：硕士学位田莉莉专业：肿瘤学完成日期：二。一三年四月答辩委员会主席：附件1：独创性声明IIlllIIIIIIIllIllIIIY2311810本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除

2、了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：——年一月一日附件2：关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论

3、文属于(请在以下相应方框内打“4”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密口。作者导师期：邳年D岁月口7日期：20l弓年，S月。c7日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2药物、主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．1人肝癌HepG一2细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．2CCK一8法检测HepG．2细胞增殖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．3流式细胞仪(AnnexinV／PI双染色法)检测HepG．2细胞凋亡率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．4流式细胞仪检测HepG．2细胞周期分布⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．5RT-PCR检测TopoIImRNA表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．6Westernblot检测TopoII蛋白

5、表达的影响⋯⋯⋯⋯122．7统计方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．CCK-8法检测华蟾素注射液对HepG一2细胞增殖的影响⋯⋯⋯·····⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯···152．华蟾素注射液对HepG一2细胞凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯163．华蟾素注射液对HepG一2细胞周期的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯184．华蟾素注射液对HepG一2细胞TopoIImRNA表达的影响⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·····⋯⋯⋯·⋯···185．华蟾素注射液对HepG．2细)抱TopoII蛋白表达的影响⋯19(四

6、)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36五、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37六、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38大连医科大学硕士学位论文华蟾素注射

7、液对人肝癌HepG-2细胞增殖及拓扑异构酶II表达的影响硕士生姓名：指导教师：专业名称：田莉莉崔晓楠教授肿瘤学摘要肝癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐渐上升趋势，死亡率亦居高不下，严重危害人类健康，目前缺乏有效的治疗措施。肝癌对化疗不敏感，有效率不超过20％；靶向药物如索拉非尼的问世也未能明显改善肝癌的治疗现状。在探讨抗肝癌药物历程中，华蟾素注射液以其多靶位的抗肝癌机制及显著的免疫提升功能，受到前所未有的关注，抗肝癌机制正在探讨中。DNA拓扑异构酶II(Topoisomerase，TopoII)在DNA