人参皂甙rg1预处理对con a诱导肝损伤的保护作用及机制研究

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1、第二军医大学硕士学位论文人参皂甙Rgl预处理对ConA诱导肝损伤的保护作用及机制研究TheTherapeuticEffectandMechanismsofGinsenosideRg1onConA—inducedLiverInjury研究生:曹利军学科专业:麻醉学研究方向:脓毒症导师:李金宝副教授培养单位:第二军医大学第一附属医院导师组成员:张燕副研究员王嘉锋讲师二0一三年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作

2、的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名:‰冬签字日期汐,;年妒可日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)靴做储躲%降导师虢勿嚷,签字日期:弘l弓年J月鼍日签字日期:p)绛厂月岁汨\目录中文摘要

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.3缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6刖『舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯b第一部分人参皂甙I远1预处理对ConA诱导肝损伤的影响⋯⋯.10材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14讨论⋯⋯⋯⋯;⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17第二部分人参皂甙R91预处理改善ConA诱导肝损伤的机制研究.18材料与方法⋯⋯⋯⋯

4、⋯‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.18结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.44在读期间发表论文和参加科研工作情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..53致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯54人参皂甙Rgl预处理对ConA诱导肝损伤的保护作用及机制研究摘要【研究目的】本实验旨在研究人参皂甙Rgl对ConA诱导肝损伤小鼠是否有保护作用并探讨其可能的作用机制。【研究方法】1.将C57

5、BL健康雄性小鼠随机分为4组:A组为生理盐水对照组(NS组):尾静脉注射生理盐水100J.tl预处理,6h后通过尾静脉注射100I_tl生理盐水;B组为人参皂甙Rgl对照组(R91组):尾静脉注射人参皂甙Rgl(5mg/ml,100肛1)预处理,6h后通过尾静脉注射生理盐水lOOpl;C组为ConA对照组(ConA组):尾静脉注射生理盐水lOOpl预处理,6h后通过尾静脉注射ConA(4mg/ml,lOOpl);D组人参皂甙Rgl保护组(R91/ConA组):尾静脉注射人参皂甙R91(5mg/ml,100肛1)预处理,6h后通过尾静脉注

6、射ConA(4mg/ml,100pd)。。2.各组小鼠经预处理后18h,心脏采血,采用全自动生化分析仪检测外周血谷丙转氨酶(舢J)、谷草转氨酶(AST)浓度,评估肝损伤程度。3.各组小鼠经预处理后18h,取肝脏组织,HE染色,病理切片观察肝损伤。4.各组小鼠经预处理后18h,心脏采血,EIlSA法检测外周血TNF.a、IFN-丫、IL.6水平。5.各组小鼠经预处理后18h,取肝脏组织,实时荧光定量PCR法检测肝脏TNF.0【、IFN吖、IL-6、CXCL.10、ICAM.1、NF.KBmRNA表达水平。6.各组小鼠经预处理后18h,取肝

7、脏组织,Westemblot法检测肝脏p65、Ir,Ba磷酸化水平。7.各组小鼠经预处理后18h,心脏采血,采用流式细胞术检测各组小鼠肝脏、外周血及脾脏CIM+、CD8+T淋巴细胞计数。【结果】1.ConA组小鼠外周血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)浓度显著高于R91/ConA组、NS组及Rgl组(尸均<0.01);而R91/ConA组与NS组及Rgl组之第二军医大学硕士学位论文间差异无统计学意义(尸均>O.05)。2.肝组织HE染色可见,ConA组小鼠肝细胞坏死严重,R91/ConA组肝脏病变较ConA组明显减轻。病理评分结

8、果显示,ConA组与Rgl/ConA组差异有统计学意义妒均<0.01),而R91/ConA组与NS组及Rgl组比较,差异无统计学意义(尸均>O.05)。3.与ConA组比较,Rgl/ConA组小鼠外周血TN

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