黄芩苷对癫痫模型大鼠行为学及对脑组织中 hmgb1nf-κb表达的影响

黄芩苷对癫痫模型大鼠行为学及对脑组织中 hmgb1nf-κb表达的影响

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1、中图分类号:R89;R36;R39硕士学位论文黄芩苷对癫痫模型大鼠行为学及对脑组织中HMGB1/NF-κB表达的影响院(系)、所临床医学院研究生姓名杜沛珊学科、专业神经病学导师姓名孙红斌教授二Ο一三年五月1目录黄芩苷对癫痫模型大鼠行为学及对脑组织中HMGB1/NF-κB表达的影响中文摘要………………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………………3第一部分HMGB1、NF-κB在癫痫点燃大鼠脑组织中的表达前言……………………………………………………………………………5材料与方法………………………………………

2、……………………………7结果……………………………………………………………………………14讨论……………………………………………………………………………17结论……………………………………………………………………………18参考文献………………………………………………………………………19第二部分黄芩苷干预对癫痫大鼠的行为学以及对HMGB1、NF-κB表达的影响前言……………………………………………………………………………22材料与方法……………………………………………………………………24结果……………………………………………………………………………26讨论………

3、……………………………………………………………………332结论……………………………………………………………………………36参考文献………………………………………………………………………37英文缩略词对照表……………………………………………………………39致谢……………………………………………………………………………40综述……………………………………………………………………………41独创性声明、版权使用授权书3中文摘要第一部分HMGB1、NF-κB在癫痫点燃大鼠脑组织中的表达目的:研究HMGB1、NF-κB在氯化锂-匹罗卡品诱导的颞叶癫痫大鼠模型海马组织中表达的

4、变化。方法:1.成年雄性SD大鼠,随机分为空白对照组与模型组(亚组:24h、72h、1w,2w,1m,2m。各组n=5),经腹腔给予氯化锂-匹罗卡品注射,构建颞叶癫痫模型。2.运用免疫荧光双标和免疫印迹研究HMGB1和NF-κB在癫痫大鼠脑组织中的表达。结果:1.免疫印迹显示,HMGB1在癫痫大鼠海马组织匀浆中表达较空白对照组升高,平均光密度值差异具有统计学意义,P<0.05;免疫荧光显示,HMGB1主要分布在癫痫大鼠神经元,在神经胶质细胞少量分布。2.免疫荧光显示,与空白对照组比较,NF-κB在癫痫大鼠脑组织中主要分布于细胞核。结论:在颞叶癫痫(Temporal

5、lobeepilepsy,TLE)大鼠模型中,大鼠痫性发作后引起HMGB1表达增高、NF-κB活化增强,提示HMGB1和NF-κB参与了癫痫的发生。关键词:颞叶癫痫大鼠模型;HMGB1;NF-κB;第二部分黄芩苷干预对癫痫大鼠的行为学以及对HMGB1、NF-κB表达的影响目的:通过观察黄芩苷干预组与模型组大鼠癫痫发作潜伏期及发作级别,了解黄芩苷对大鼠痫性发作的影响,检测HMGB1、NF-κB的表达,推测黄芩苷影响大鼠癫痫发生的潜在机制。方法:1.行为学观察:成年雄性SD大鼠,随机分为模型组、黄芩苷低剂量干预组、黄芩苷高剂量干预组(各组n=8);在给予匹罗卡品造模前

6、30min,分别给予大鼠黄芩苷低剂量100mg/kg和高剂量200mg/kg腹腔注射,观察癫痫大鼠行为学改变。2.在1海人酸单侧侧脑室注射和氯化锂-匹罗卡品腹腔注射,建立的颞叶癫痫大鼠模型中,运用免疫印迹对比模型组、黄芩苷干预组(亚组:6h,24h、72h、1w。各组n=5)中HMGB1在癫痫大鼠脑组织中的表达。在氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,运用免疫组化对比研究HMGB1在癫痫大鼠脑组织切片中的阳性细胞数。氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,运用免疫印迹和免疫荧光对比研究NF-κB在癫痫大鼠脑组织中的活化情况。结果:1.与模型组对比,黄芩苷干预

7、组中出现RacineⅣ-Ⅴ级癫痫发作大鼠的潜伏期明显延长,且组间有明显改变,差异有统计学意义(P<0.05);匹罗卡品腹腔注射后,60分钟观察期内黄芩苷干预组癫痫大鼠发作级别较模型组降低。2.在海人酸单侧侧脑室注射和氯化锂-匹罗卡品腹腔注射的颞叶癫痫大鼠模型中,免疫印迹显示黄芩苷干预后,HMGB1在各时间点癫痫大鼠海马组织匀浆中表达较模型组降低,组间平均光密度值差异具有统计学意义,P<0.05;在氯化锂-匹罗卡品介导的颞叶癫痫大鼠模型中,免疫组化结果显示黄芩苷干预后HMGB1在癫痫大鼠脑组织切片中的阳性细胞数较模型组减少,差异具有统计学意义,P<0.05。3.在氯

8、化锂-匹罗

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