酶法制备大米抗氧化肽的蛋白酶筛选

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1、万方数据2010年11月农业机械学报第4l卷第11期DOI：10．3969／j．issn．1000—1298，2010．11．023酶法制备大米抗氧化肽的蛋白酶筛选马海乐1刘斌2李树君1’2贾俊强1田万敏1(1．江苏大学食品与生物工程学院，镇江212013；2．中国农业机械化科学研究院，北京100083)【摘要】通过酶法制备进行大米抗氧化肽蛋白酶的筛选。以大米蛋白为原料、酶解液对DPPH自由基清除率为指标，从风味蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶等7种蛋白酶中，筛选出中性蛋白酶为最佳用酶。通过试验得出最佳的酶解反应条件为：底物质量浓度1．0g／(10

2、0mL)、加酶量8％、pH值6．0、温度60。C、酶解时间30rain。酶解液稀释15倍对DPPH自由基的清除率为89．45％，酶解液清除DPPH自由基的EC，。值为0．217g／(100mL)。关键词：大米蛋白抗氧化肽蛋白酶筛选DPPH自由基清除率正交试验中图分类号：TS210．9文献标识码：A文章编号：1000—1298(2010)11—0119—05EnzymaticPreparationofRiceAnti-oxidationPeptideMaHailelLiuBin2LiShujunlJiaJunqian91TianWanminl(1．SchoolofFoodandBiologi

3、calEngineering，JiangsuUniversity，Zhe蛳ang12013，China2．ChineseAcademyofAgriculturalMechanizationSciences，Beijing100083，China)AbstractProteasescreeningwasemployedtopreparericeanti-oxidationpeptidewithenzymolysismethod．ScavengingrateofhydrolysatetotheDPPHradicalwasusedasanindexwithriceproteinastherawm

4、aterial．Neutralproteasewasscreenedoutfromthefollowingsevenkindsofprotease．Thesekindsofproteasewereflavorprotease，neutralprotease，trypsin，complexprotease，alkalineprotease，papainandpepsinrespectively．Theoptimumhydrolysisconditionsobtainedfromtheexperimentswereasthefollowing：concentrationofsubstratew

5、as1．0g／(100mL)，ratiosofenzyme-substratewas8％，pHvalue6．0，60℃and30rainofreactiontime．Afterbeingdiluted15times，scavengingrateofhydrolysateliquidtotheDPPHradical89．45％couldbeobtainedandEC50valueofhydrolysatescavengingDPPHradicalwas0．217g／(100mL)．KeywordsRiceprotein，Anti-oxidationpeptide，Proteasescreen

6、ing，ScavengingrateofDPPHradical．Orthogonaltest引言大米蛋白中不仅不含抗营养因子，而且还具有低过敏性、无异味、消化率高等优点。米糟作为大米加工后的副产品，其蛋白质含量一般在40％～50％(干基)，但目前主要用作动物饲料，其价值远未得到充分利用¨1。如果能进一步综合利用，将会收到可观的经济、社会效益。生物活性肽由于功能性好、易被人体吸收利用、安全性高和生产成本低等优点而具有很好的市场前景嵋。。。利用大米蛋白生产具有特殊功能的生物活性肽，应是提高其附加值和扩大应用范围的途径之‘。一O酶解法生产活性肽不仅具有其他方法无法比拟收稿日期：2010—01—0

7、8修回日期：2010—03—06+“十一五”国家科技支撑计划资助项目(2006BAD27806)、科技部国际合作项目(2009DFA32000)和江苏省2008普通高校研究生科研创新计划资助项目(CX08B一149Z)作者简介：马海乐，教授，博士生导师，主要从事食源性多肽的制备及功能评价研究，E·mail：mhl@ujs．edu．en．万方数据120农业机械学报的安全、高效等优势，而且也是目前研究的热点。4。。不同的蛋白