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1、细胞生物学杂志年,,一正是这些杂质促使成冰核效应发生又如不同类型,,,一。【〕王君晖等实验生物学报的抗冻蛋白表现出不同的成冰核行为这些都是新,,,,,,,,」为呱刀人劝,。模型不曾包含的内容有待进一步研究入岁尺邵,,叨,,一肠,犯,,,召硬尤去目前对鱼类四种抗冻蛋白工型到型及一种〕段落子,一抗冻糖蛋白的研究,〔,〕召幻川比较详细对植物抗冻蛋白,,,,,、仁一。‘,‘“〕。和昆虫抗冻蛋白的研究也在不断深人黑麦从‘墩才反,一,,口,,。」扫泛仪去。户丙笋草肠加抗冻蛋白阻止重结晶的能力比一,鱼类抗冻蛋白和昆虫抗冻蛋白强得多并且与脱水【,,,丙笋,一,。」蛋白一样它们是煮沸稳定蛋白〕转,,,,,
2、,块沁,一基因烟草稳定合成胡萝卜抗冻蛋白在温室生长条,,,,,件下就有很强的抗冻性山〕。总体来说,无论对应用沁沁,一,低温生物学还是对理论低温生物学抗冻蛋白都具〕,改,压,,,沁,‘,。一有重要意义,,,,,,、〔一〕,记明夕一参考文献,,,,、〕界下访女记哪黔、,,,一〔王君晖黄纯农一细胞生物学杂志一一一,,,,,,,,,、,,,,右‘饭。,,一一〕五夕。仁」‘“上〕,物,,,,沁,二,一,,,,口,,一凡万〕互,夭,员,,泛,一,,,,,,,〔、。一」反肠,,红〕,,,,云涅石多一,,,,,,二,群,,,,,,一〕从,,,,,,,,,,一〔〕反。。,,,“仁」公印二以反‘一关绿色荧光
3、蛋白及其在细胞生物学研究中的应用吴春利刘洁生’‘杨维东暨南大学生物工程学系广州绿,,色荧光蛋白的强很多激发后很容易用肉眼观察到有的则是温,。度突变型其表的发现和应用被称为细胞生物学上的一次革命达不受温度的限制有的突变体。年川等首先从一种水母类动物则可以特异地在某些物种中高效表达这些突变体户,明。。、家。,极大地拓宽了的应用范围使在生物学认中分离纯化出了年。,曰〕等克隆了基因的并分析了的应用显示出更为广阔和诱人的前景,‘的一级结构年】等最早用重、一绿色荧光蛋白的分子组野生型基因做报告基因,成功地在原核和真。,特性及发光机制核生物中得到表达此后人们对的性质和应,用进行了不断深入的研究,现在它
4、已经发展成了现随着对绿色荧光蛋白研究的深人人们发现从、。不同动物体内提取的荧光蛋白的结构性质不尽相代生物学研究的一个精确工具目前在细胞,。生物学、植物学、动物学、微生物学等学科研究中都同不同动物品种的荧光产生机理也有很大的差别。目前研究得较为深人的是来自多管水母科有着相当广泛的应用随着人们对发光机制研究的深人,通过对其发光团区域和其它区域进行‘随机诱变,已经得到了许多突变型,有的发蓝教育部科学技术研究重点项目和广州市科技。一一一项目资助课题光或黄光而不是绿光闭有的发出的荧光比野生型‘’。通讯联系人第卷第期细胞生物学杂志和海紫罗兰科的荧光蛋白,即从他们自己构建的水母‘和,对前者的研究相对更
5、深人一些,文库中分离到命名为的。、。,,应用也更为广泛和都是酸性球克隆该片段只有个碱基编码个氨基酸,。’’,状的蛋白质它们的氨基酸组成也很相似据此推测它缺少和编码区以此为探针再次筛,,。是分子量为的单体而则是分子量为库时没有发现另外的克隆当用序列。的同型二聚体正常状态下二者的激发光谱作为杂交探针筛选的另一文库,,,。不同在和具有吸收高峰时没有发现另外的克隆当用,序在具有强烈的光吸收而发射光谱列作为杂交探针筛选的另一文库。,入,。基本相同均为但当两种蛋白质变性后它时也没得到相关的重组子当,,们的吸收光谱和发射光谱均相同这说明这两种蛋进一步扩增保留在培养皿中的噬菌体文库时发现,,,,,。白质
6、可能含有相同的生色基团但由于生色基团与了个重组子即片段序,‘,其周围的蛋白质组分的连接方式不同使得两者的激列共有个核昔酸其端非编码区很短无。发光谱产生。一了不同尾一个多腺昔酸信号位于位,。最近的研究表明的分子特性和发光机制核昔酸彭包含一个编码个氨基酸。,。是很独特的三维结构呈圆柱体条链的俘的阅读框架用为探针也能从一,,片层包围着内部的螺旋短的螺旋片段在圆柱两认基因组文库中筛选到种克隆,一一端可环化的生色团币灼三肤在这和天然存在种不同同分异构体的结果相,。,螺旋上靠近圆柱体的几何中心生色团的形成首符合实践也证明基因确实存在种限制性酶。,先是必的氨基对币的碳基亲核进攻而环化切图谱对基因结构进
7、一步研究表明它由,,、。成五元环同时失去一分子水形成咪哇基的第位个外显子组成分别编码和个氨基酸。,碳原子在有氧条件下新的双键促进后来的许多突变体都是在其基础上通过改变。、,。币的二肠件氧化脱氢从而形成一个连续的电若干碱基而得。子芳香族系统生色团川但的荧光发生、—,三绿色荧光蛋白的应用特点机理目前还不清楚等人年曾提出一,易个能量传递模式图来解释水母的发光机制但并未于检测。,,获得认同等对进行了光谱分析不需外加任何反应底物和辅助因子只需
