泥鳅消化道指数及消化酶活性分布的研究

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1、万方数据第28卷第5期2009年5月水产科学FISHERIESSCIENCEV01．28No．5May2009泥鳅消化道指数及消化酶活性分布的研究陈苏维1’2，吉红2，朱文东1，熊传喜3，曹福余2(1．安康学院农学与生命科学学院，陕西安康725000；2．西北农林科技大学动物科学学院，陕西杨陵712100；3．华中农业大学水产学院，湖北武汉430070)摘要：研究了泥鳅消化道指数及消化酶活性在肠道不同部位(前肠、中肠及后肠)和肝胰脏的分布。试验结果表明．泥鳅比肠长为0．335士0．006，比肠质量为0．

2、021土0．002．比肝质量为0．015士0．001，其特征偏肉食性。泥鳅肝胰脏淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的活性均极显著高于其他部位，分别为(45．464士2．442)、(580．515士12．282)、(28．889士3．849)U／ml。关键词：泥鳅；消化道指数；消化酶；活性分布中图分类号：$965．199文献标识码：A文章编号：1003—1111(2009)05．0272-04泥鳅(Misgurnus彻g“洲icn甜dn￡”s)生命力强，分布广泛，营养丰富，对肝炎、小儿盗汗、痔疮下坠、皮肤瘙痒、跌打损

3、伤、手指疔疮、阳萎、腹水和乳痈等症均有良好的疗效。作为底栖生物，泥鳅对于水环境污染程度及污染物种类均起着一定的指示作用，常作为水污染指示生物。目前我国很多地方大规模养殖泥鳅，尤其是江苏省赣榆县，泥鳅养殖已成为当地的一种产业。但目前市场上泥鳅人工配合饲料的饲料系数较高。笔者对泥鳅的消化道指数及消化酶活性分布进行了初步的研究，以期为泥鳅人工配合饲料的开发奠定一定的理论基础。1材料与方法1．1试验鱼试验泥鳅购自西安市炭市街水产批发市场。一龄，健康无伤，平均体长(14．338±2．625)cm，平均质量(16．

4、816±9．869)g。鱼购回后在水族缸(80cmX60cm×40cm)暂养1周后进行测定。1．2酶液制备参照北京大学生物系生化教研室[1]及黄耀桐等[23的方法制备泥鳅酶液。将泥鳅剪头部致死，然后测体长、质量(包括头部)。取出内脏，分离肠道及肝胰脏，将肠道分为前肠(肠道第一扭节前)、中肠和后肠(中、后肠平分)。剪开肠道去除内容物，用去离子水冲洗肠道内壁和肝胰脏，滤纸吸于多余水分，然后分别称取质量。以10～12尾鱼的同一部位合并为一个样本，对肝胰脏及各肠道组织加入10倍质量的去离子水，在冰浴中充分匀浆后

5、，4℃，12000r／min，离心10min，所得上清液即为酶液。将所得酶液按前肠、中肠、后肠和肝胰脏四个处理编号后置冰箱4℃贮存，24h内测定完毕。每个指标设3个重复，每个样本设3个平行。1．3消化道指数测定将248尾样品测定体长、体质量后，取出内脏、肠道和肝胰脏分别称质量，并测定肠道长度。然后参照尾崎久雄[3]的方法测定泥鳅的比肠长(肠长与体长之比)、比肠质量、比肝胰脏质量、比内脏质量(分别以肠质量、肝胰脏质量、内脏质量与鱼体质量之比)等消化道指数。1．4消化酶活性1．4．1淀粉酶活性测定用3，5一

6、二硝基水杨酸(DNS)法测定淀粉酶活性[4-s]。淀粉酶活性定义为：在pH7．5、37℃下，淀粉酶每分钟催化淀粉产生1mg麦芽糖为一个活性单位(U)。取2m11％淀粉溶液，在37℃水浴中预热5min后加入1mlpH7．5的磷酸缓冲溶液，再加入1ml酶液准确反应5min。然后加入0．4mol／LNaOH溶液4ml终止反应。取该体系溶液2m1加入DNS2ml，混匀，置沸水浴中准确煮沸5min后取出冷却，用蒸馏水稀释至25m1，用分光光度计(UV一1240紫外分光光度计)于540nm波长下测定其OD值。从麦芽

7、糖标准曲线中查出麦芽糖含量，计算淀粉酶活性。1．4．2蛋白酶活性测定用福林酚试剂法测定蛋白酶活性[4一引。蛋白收稿日期：2008—06—16l修回日期：2008—09—12．基金项目；安康学院专项经费项目(007AKXY031)；西北农林科技大学安康水产试验示范站建设项目(202422)．作者简介·陈苏维(1975一)，女·讲师·硕士，研究方向：水生动物生物化学与分子生物学lE—mail：chsw04(孕163．com．通信作者：吉红(1967一)，男，副教授，博士，研究方向：水产动物营养与饲料lE-m

8、ail：jihon90405@hotmail．com．万方数据第5期陈苏维等：泥鳅消化遭指数及消化酶活性分布的研究273酶活性定义为：在pH7．5、37℃下，蛋白酶每分钟水解酪蛋白产生1弘g酪氨酸为一个酶活性单位(U)。取1．O％酪蛋白1ml，加入2mlpH7．5的磷酸缓冲溶液，37℃水浴5min后，加入酶液lml，准确反应15rain，用4ml10％三氯乙酸终止反应，离心去除沉淀(5000r／m，5rain)后取上清液lml，再各加5ml