胆汁内外引流对梗阻性黄疸大鼠胃黏膜结构及功能的影响

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1、骆小江胆汁内外引流对梗阻性黄疸大鼠胃黏膜结构及功能的影响第一部分摘要中文摘要目的梗阻性黄疸(obstructivejaundice，OJ)病人术后易并发消化道出血死亡，术前胆道引流可以降低术后并发症和死亡率，但引流方式的选择存有争议，此试验通过建立梗阻性黄疸动物模型，比较梗阻性黄疸和内、外引流(intemalbiledrainageandexternalbiledrainage，IDandED)后血清肿瘤坏死因子Q(tumornecrosisfactorQ，TNF．Q)、一氧化氮(nitricoxid

2、e，NO)和胃黏膜内NO、诱生型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)的含量，以及通过对胃黏膜病理改变的观察，比较梗阻性黄疸内、外引流的优劣，同时探讨梗阻性黄疸导致胃黏膜损伤的相关机制。方法实验动物分组：健康雄性纯系SD大鼠100只，12"--14周大小，体重270--一3209，由扬州大学医学院动物实验中心提供，许可证号：SCXK(苏)2007．0001。将实验大鼠按动态随机法分为5组，分别建立梗阻性黄疸7天组(obstructivejaundicefor

3、7daysgroup，OJ．7组)、梗阻性黄疸14天组(obstructivejaundicefor14daysgroup，OJ-14组)、胆汁内引流组(internalbiledrainagegroup，ID组)、胆汁外引流组(externalbiledrainagegroup，ED组)及假手术组(shamoperationgroup，SH组)模型。建立梗阻性黄疸模型：所有大鼠适应性饲养一周。术前禁食8小时，自由饮水。予1％戊巴比妥钠(3．5mg／1009)腹腔注射麻醉，四肢及头部固定于手术台，腹部

4、皮肤准备完毕，严格皮肤消毒后铺巾，取上腹部正中切口进腹，找到胆总管，距十二指肠开口处约1cm处游离出0．5cm左右长度的胆总管。SH组游离后直接关腹；实验组(包括OJ．7组、OJ．14组、ID组、ED组)在距胆总管十二指肠开处口处约1．0cm处以4号丝线双重结扎胆总管后关腹。术后待大鼠恢复活动后自由进食饮水，饲养一周。OJ．7组于第一次手术后满7天处死取材。其余四组(包括SH组、OJ．14组、ID组、ED组)在第一次手术后第7天进行第二次手术，术前禁食8小时，自由饮水。予1％戊巴比妥钠(3．5m∥10

5、09)腹腔注射麻醉，四肢及头部固定于手术台，腹部皮肤准备完毕，严格皮肤消毒后铺巾，寻第一次手术时的腹部切口进腹，游离出胆总管。SH组进腹后游离胆总管后关腹；0J．14组进腹后游离胆总管后关腹；ID组予硬膜外导管内引流胆总管内胆汁；ED予聚乙烯外引流管由颈背部外引流胆总管内胆汁。术后待大鼠恢复活动后自由进食水，饲养一周。第二次手术后满7天处扬州大学硕士学位论文lIIIIIIIIIImlllllllllllllllH洲llll，Y2419383死所有实验动物取材。实验过程中，各组实验动物如有非实验要求死亡

6、的，采用同批次动物以相同手术实验过程予以补充。取材：术前禁食8小时，自由饮水，予1％戊巴比妥钠(3．5mg／1009)腹腔注射麻醉，四肢及头部固定于手术台，腹部皮肤准备完毕，严格皮肤消毒后铺巾，取上腹部原手术切口进腹，下腔静脉取血8rnl，静置1小时后，以3000r／min4。C离心15min，取血清保存于．70。C冰箱待测TNF．Q和NO。将胃取下，取下的全胃沿大弯侧剪开，用冰盐水冲洗干净。取腺胃部分，每个胃组织块2到3个，大小约2×2mm的胃壁全层标本。迅速用10％dP性甲醛进行固定，充分固定后脱

7、水、浸蜡、石蜡包埋，制作成胃组织蜡块。将剩余胃腺黏膜取下来，．70。C冰箱保存，测定胃黏膜NO和iNOS。结果SH组：血清TNF．Q(11．93-4-2．15pg／m1)、NO(73．71士2．77砌ol／L)，胃黏膜内NO(4．30_+0．20)、iNOS(4．27+0．16U／mgpot)；OJ．7组：血清TNF．¨(53．46±2．99pg／m1)、NO(85．93±1．90umol／L)，胃黏膜内NO(5．64±0．24)、iNOS(5．80+0．24U／mgprot)；OJ．14组：血清TN

8、F．Q(77．03+1．45pg／m1)、NO(100．58土2．36umol／L)，胃黏膜内NO(6．73±0．20)、iNOS(6．52+0．．28U／mgprot)；ID组：血清TNF—a(12．60-4-2．57pg／m1)、NO(75．46-t-3．08umol／L)，胃黏膜内NO(4．44±O．28)、iNOS(4．31±O．18U／mgprot)；ED组：血清TNF一(71．45±3．03pg／m1)、NO(96．03±2．87umol／L