雌性三倍体虹鳟性腺分化期间脑芳香化酶及相关基因的表达研究

《雌性三倍体虹鳟性腺分化期间脑芳香化酶及相关基因的表达研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学校代码：10264研究生学号：M150101009上海海洋大学硕士学位论文雌性三倍体虹鳟性腺分化期间脑芳香题目：化酶及相关基因的表达研究Expressionofbrainaromataseandcytochromegeneduringtheearly英文题目：gonadaldevelopmentoftriploidfemalerainbowtrout专业：水产养殖研究方向：分子遗传与育种姓名：相福生指导教师：王炳谦二O一八年四月四日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位

2、论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保

3、存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注主席委员委员委员委员委员委员秘书答辩地点答辩日期上海海洋大学硕士学位论文雌性三倍体虹鳟性腺分化期脑芳香化酶及相关基因的表达研究摘要虹鳟（Oncorhynchusmykiss（Walbaum,1792）），隶属于辐鳍亚纲（ray-finnedfishes）、鲑形目（Salmoniformes）、鲑科（Salmonidae）、大麻哈鱼属（

4、Oncorhychus）。虹鳟是典型的冷水性鱼类，具有高蛋白、无肌间刺、出肉率高的特点，富含EPA和DHA等不饱和脂肪酸适合冷水资源增殖放流和集约化养殖。Cyp19a1b、Cyp11a1、Cyp11b2、Cyp17a1、Hsd3b1等基因能够调节硬骨鱼类性类固醇的合成，对性腺发育和性别决定产生影响。本研究以三倍体雌性虹鳟为研究对象正常二倍体雌性虹鳟为对照，选取31-68dpf（dayspostfertilization）时间段的虹鳟仔鱼脑组织，采用qRT-PCR、酶联免疫吸附测定和组织切片的方法研究以上几种基因表达、CYP19A1B（脑芳香化

5、酶）的活性变化以及原始生殖细胞（PGCs）的发育以期探明三倍体雌性虹鳟性腺发育异常的关键原因。研究结果如下：1芳香化酶通路基因在三倍体雌性虹鳟早期不同发育阶段的表达分别提取31-68dpf三倍体雌性虹鳟的脑组织RNA，经琼脂糖凝胶电泳和ScanDrop核酸分析仪检测，RNA片段完整性良好，将RNA反转录得到cDNA，经内参β-actin检测可用于荧光定量PCR。二倍体和三倍体Cyp19a1b基因的表达量的整体趋势基本一致，且在35-45dpf时期该基因在二者脑组织中的表达均达到高峰，但二倍体的表达量较三倍体高近30倍（p<0.05）；在65d

6、pf时，Cyp19a1b基因在二倍体和三倍体中的表达量出现第二次高峰，此时都与其自身第一次高峰的表达一致，二倍体的表达量仍是三倍体的30倍（p<0.05）。在30-50dpf时期，二倍体虹鳟的Cyp11a1基因的表达量维持较高水平；在38dpf时，三倍体虹鳟Cyp11a1基因表达量首次达到峰值，较二倍体有所延迟，之后开始下降，在49dpf时出现第二次高峰。在33-42dpf时期，二倍体虹鳟的Hsd3b1基因表达量维持较高水平，在38dpf时出现高峰；在47-59dpf时期，三倍体虹鳟Hsd3b1基因表达量较高，高峰时期明显晚于二倍体，且峰值低

7、于二倍体虹鳟。35dpf时的二倍体和三倍体虹鳟Cyp11b2的基因表达量同时到达高峰，但二倍体表达水平较三倍体高近5倍（p<0.05）；41dpf-69dpfI上海海洋大学硕士学位论文时期二倍体虹鳟Cyp11b2基因表达量开始下降并且维持在较平稳的水平，此时间段内三倍体在65dpf时出现小幅上升，且表达量与同期二倍体水平一致。二倍体虹鳟Cyp17a1基因的表达量在35-46dpf时逐渐上升，在45dpf时达到高峰之后直至69dpf逐渐下降，并且维持在较为平稳的水平上，但是在相同的实验条件下未检测到同一时期三倍体虹鳟Cyp17a1基因的表达量。

8、2脑芳香化酶在二、三倍体雌性虹鳟不同发育阶段的活性在发育早期阶段，二倍体与三倍体雌性虹鳟脑芳香化酶活性（CYP19A1B酶）整体趋势大体一致，在40dpf时二者的脑