槲皮素对产后缺乳模型小鼠的治疗作用及其机制研究

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级:__________UDC:___________槲皮素对产后缺乳模型小鼠的治疗作用及其机制研究姓名：林曼学号：2111576018院系：护理学院学位类型：专业学位专业：护理学研究方向：母婴护理导师：由天辉教授论文提交日期：2018年3月19日论文答辩日期：2018年5月24日学位授予单位：广东药科大学二○一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文TheEffectandMechanismofQuercetinforCuringDeficient-MilkMiceCandidate：LinManStude

2、ntID：2111575018Affiliation：SchoolofNuringAcademicDegreeApliedfor：MasterofMedicineNuringSpeciality：NuringSupervisor：Prof.YouTianhuiAssistantSupervisor：Prof.LiuBingDayofDefence：May2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniversity52018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学学位论文原创性声明本人郑重声明：

3、本人所呈交的学位论文，系我个人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。除文中已特别加以标注和致谢的地方外，不包含其它个人或机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研究做出贡献的其它个人和集体，均已在文中明确说明和致谢。本人充分意识到本声明的法律结果完全由本人承担。学位论文作者签名：日期：2018年5月24日学位论文使用授权的声明本人完全了解广东药科大学有关保留和使用学位论文的规定，学校有权保留和向有关部门或机构送交本论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库，可以采用影印、缩印或其它复印手段保存和汇编本学位论文。保密论文

4、在解密后适用本声明。论文作者签名：论文导师签名：日期：2018年5月24日广东药科大学硕士研究生学位论文槲皮素对产后缺乳模型小鼠的治疗作用及其机制研究摘要目的：产后缺乳是指产妇在哺乳期内，乳汁不能满足正常育儿需求的临床病症。近年来，产后缺乳呈逐渐高发的趋势，产妇产后泌乳障碍，严重影响了世界婴幼儿的纯母乳喂养率，因此产后缺乳作为影响母乳喂养的首要因素，迫切需要我们找到应对产后缺乳的治疗与护理措施，这对提高纯母乳喂养率具有重要意义。催乳素是参与乳汁分泌的重要激素，催乳素主要依赖于垂体前叶泌乳细胞的分泌，而植物雌激素可刺激泌乳细胞增殖和分泌催乳素。槲皮素作为植物雌激素中化学

5、结构最接近雌激素的一种天然化合物，已被证明其低毒高效的生物活性。因此本课题通过建立适当的产后缺乳小鼠模型，探讨适宜浓度下，槲皮素对产后缺乳小鼠的治疗效果及其机制的探究。方法：设定1.6mg/kg的溴隐亭给药剂量，构建产后缺乳小鼠的模型；设计不同槲皮素药剂量组，通过观察对产后缺乳小鼠泌乳量的变化，仔鼠窝重的变化，筛选出最佳剂量；设计空白组、模型组、阳性组和槲皮素组，分别灌胃生理盐水、溴隐亭、溴隐亭+17α-雌二醇、溴隐亭+槲皮素。分析每日泌乳量和评估仔鼠的生长发育情况，在第十天进行血清及组织器官提取。对乳腺、肾脏、肝脏进行HE染色切片观察组织学变化；通过免疫印迹检测垂体

6、中催乳素、乳腺中β-酪蛋I广东药科大学硕士研究生学位论文白以及小鼠乳腺上皮细胞中催乳素受体的蛋白表达；采用q-PCR检测垂体中催乳素基因和乳腺中乳糖乳脂相关基因：硬脂酰辅酶A去饱和酶,脂肪酸合成酶和α-乳清蛋白的表达；Elisa试剂盒检测乳腺组织液和血清中的催乳素的浓度，卵泡刺激素，黄体生成素的水平；体外培养小鼠乳腺上皮原代细胞，并通过MTT试验观察槲皮素对小鼠乳腺上皮细胞的影响并探讨其中的影响机制；结果：验证溴隐亭作为产后缺乳小鼠的造模剂量为1.6mg/kg；确定了缺乳模型小鼠槲皮素最优给药剂量为50mg/kg；相比模型组，槲皮素组的乳腺外观和病理切片以及乳腺指数接

7、近于对照组，仔鼠窝增重得到明显提高，同时槲皮素可提高缺乳模型小鼠的垂体中催乳素蛋白和基因的表达，同时也可使血清和乳腺组织中的催乳素浓度有明显的提高。除此之外，槲皮素组可以提高乳腺组织β-酪蛋白的基因和蛋白表达，同时可提高中乳糖和乳脂相关基因：硬脂酰辅酶A去饱和酶,脂肪酸合成酶和α-乳清蛋白的表达。实验发现槲皮素组和空白组的肝脏、肾脏、子宫和卵巢的相对质量比较和病例切片，卵泡刺激素和黄体生成素的浓度比较没有较大的差异；体外实验证明，槲皮素促进提高小鼠乳腺上皮细胞的增殖，同时也可提高催乳素受体的蛋白和基因表达水平，当阻断Akt通路时，催乳素受体蛋白表达水