奶牛流产胎儿弯曲菌的分离鉴定

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1、#*中国兽医杂志#--/年（第/-卷）第"#期$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$9E234@4V0I?3780HG464?237?234$$奶!牛!流!产!胎!儿!弯!曲!菌!的!分!离!鉴!定"#""""""朱战波，崔玉东，侯喜林，倪宏波，杨玉英，邵$红，潘$燕，朴范泽（"%黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆"&’’"(；#%黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江大庆"&’’"(）中图分类号：)*+*%#’+%"$$文献标识码：,$$文章编号：-+#(.&--+（#--/）"#.--#*.-#$$牛生殖道弯曲菌

2、病（,01234543267897:;<80=.!"材料与方法7>64?20@2@）是由胎儿弯曲菌引起的一种以不育、胚胎"%"$材料早期死亡及流产为特征的传染病。胎儿弯曲菌是一"%"%"$病料$为无菌采取的流产病牛子宫内容物［"，#］种微需氧的革兰氏阴性菌，分为胎儿亚种（!"#$%及流产胎儿真胃内容物。［*］&’((’)(*"#$&’(）和性病亚种（!"#$&’((’)(*"+$,$-$.%"%"%#$细菌分离培养基$按陈天寿等介绍的方/0(）。胎儿亚种引起牛散发性流产和羊地方流行性法制备营养琼脂、"-R兔鲜血琼脂、巧克力琼脂及改流产，也可感

3、染人，引起流产、早产、败血症以及类似良布氏琼脂培养基等。布鲁氏菌病的症状。性病亚种是牛生殖道弯曲菌病"%"%’$试验用动物及鸡胚$体重为"&M#-L的健的病原，主要引起不育、胚胎早期死亡及流产，给奶康小鼠由牡丹江医学院实验动物中心提供。种蛋由［’］牛业造成严重的经济损失。鸡西市发电厂农场养殖厂提供，自行孵化至"#天的A>B7D:73于"("’年自流产绵羊鸡胚用于试验。胎儿体内分离出某些生物学特性与弧菌相似的细"%"%/$药敏纸片$由杭州市天和微生物试剂有限［/］公司生产，批号为#----(-(。菌，"("(年):26E

4、F7<80?将其命名为胎儿弧菌（G2=?20H46I@）。"(+J年K23L将不同来源的微需氧"%#$方法弧菌按培养温度不同而分为两个群，即#+M’JN生"%#%"$病料涂片镜检$以无菌采取的流产牛子宫长、/#N不生长者为胎儿弧菌；#+N不生长，’JN及内容物及流产胎儿真胃内容物直接涂片，分别做革/#N生长者为相关弧菌［+］。"(J’年)4=78C和G4?03兰氏染色和科兹洛夫斯基氏染色，镜检。发现这些微需氧弧菌不发酵葡萄糖，OPQ组成及含"%#%#$细菌分离$将病料分别接种于营养琼脂培量不同于弧菌属，为了区别于弧菌而采用了弯曲菌养基和"-R

5、兔鲜血琼脂培养基，在需氧、厌氧条件（!.1*2/3).4&$-）这一名称［&］。胎儿弯曲菌是弯曲菌下’JN培养#/E；接种改良布氏琼脂培养基，在属中得一员。到目前为止，在欧洲、美洲、澳洲和非"-R9U#条件下’JN培养#周；同时接种"-R兔鲜洲均有胎儿弯曲菌分离和致病的报道，尤其在澳大血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基，在*+RP#、"-R利亚、南非、美国和前苏联。东南亚的印度、斯里兰9U#和+RU#的微需氧条件下#+N培养/*E。观卡、印度尼西亚、日本等也有报道［J］。但国内未见察细菌生长情况。胎儿弯曲菌分离的报道。"%#%’$细菌纯培养$从初

6、次分离培养的平板上挑#--"年&月，黑龙江省牡丹江市某奶牛场饲养取可疑菌落进行涂片镜检及初步鉴定，如果细菌为J--余头奶牛，怀孕母牛陆续发生流产。"个月后，弯曲的杆状、革兰氏染色阴性、氧化酶和过氧化氢酶采集流产母牛血清用布鲁氏菌病抗原作试管凝集试阳性、呈螺旋或投标式运动，则进行纯分离培养。验，其结果均为阳性。因此对全群母牛用布鲁氏菌"%#%/$细菌鉴定病A+号菌苗进行免疫接种，之后流产现象虽然有"%#%/%"$呼吸需求试验$将细菌纯培养物重新接种于"-R兔鲜血琼脂培养基，分别在需氧和"-R所缓解，但至今仍不断发生，流产率约为"/R。流产后因胎

7、衣不下引起的子宫内膜炎、长期不孕和其9U#条件下’JN培养/*E；在含*+RP#、"-R9U#他严重的子宫疾病而淘汰的奶牛已"*-余头。根据和+RU#的微需氧条件下#+N培养/*E，观察细菌的生长情况。以上情况，我们对该群奶牛流产的病原进行了分离，"%#%/%#$生长试验$甘氨酸生长试验、P798生长经鉴定为胎儿弯曲菌性病亚种。报告如下。试验、胆汁生长试验以及温度生长试验按参考文献收稿日期：#--/.-".-#［(］进行。将分离菌株接种于培养基后，在微需氧通讯作者万方数据：崔玉东，S.:728：I2T<7E00%>0:条件下培养

8、J#E，观察纪录结果。&&60?@ABACDEF@=2DGHAIAF?@=FJ>AK?L?@A&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&中国兽医杂志#’’$年（第$’