家兔和人卵巢组织冷冻复苏及异种移植的实验研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofDoctorTheExperimentalStudiesonCryopreservationandheterologousectopictransplantationofOvarianTissueofRabbitsandHumanDoctoralCandidateSupervisorXinglingWang(1)(2)Porf．HuirongShi(1)(1)DepartmentofObstetricsandGynecology，TheFirstAf

2、filiatedHospitalofZhengzhouUniversity，HenanZhengzhou450052(2)ReproductiveMedicalCentre，TheThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity，HenanZhengzhou4500522013．4学位论文原创性声明fNilIIIIIIHIIIlUVllIIfY2314274在此郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。本文中除已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研

3、成果。对本文的研究作出重要贡献的个人与集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：<蛔筋广—1，，日期：纠裨加。1日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及其相关职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学位论文或成果时，第

4、一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：劫污日期：力叽≥年台月c日摘要家兔及人卵巢组织冷冻复苏及异种移植的实验研究研究生王兴玲导师史惠蓉专业妇产科学郑州大学第一临床学院中国郑州450052要近年来，随着社会的发展，生活水平的提高，人们对自身健康及生殖质量日益关注，对生殖能力的保存提出了越来越高的要求，由此极大地促进了学者们对人类卵巢组织冻存技术的研究和临床应用的探索。2008年，WHO调查发现140万例新增肿瘤患者中近70万是女性，<40岁育龄妇女占8％。放、化疗及手术等治疗有效地治疗了患者的疾病并延长了生命，但大剂量放

5、疗、化疗和卵巢手术可导致年轻女性生殖力的丧失。保存女性生殖能力的方法有：取卵并行体外受精后胚胎冷冻、取卵后卵子冷冻、卵巢组织冷冻。因胚胎冷冻及卵子冷冻需要进行促排卵、取卵等较长周期的治疗，影响和延误恶性肿瘤患者的治疗，且只适用于已婚女性，因此应用受到限制。而卵巢组织冷冻保存不需要对卵巢进行药物刺激促排卵，在手术及化疗前直接切除卵巢组织进行冷冻，不影响患者自身原有恶性肿瘤及疾病的化疗及放疗，对女性生育储备的生殖内分泌功能保存有着重要的意义，为此类患者提供了一种补偿方法。20世纪50年代初，Parkes将大鼠卵巢组织切片慢速冷冻保存于_79。C的甘油盐水

6、混合液中，快速解冻复苏后自体移植，之后观察到移植的卵巢组织出现卵泡生长发育，大鼠恢复了内分泌功能。20世纪90年代，卵巢组织冷冻随着冷冻科学技术的发展和改进以及各种抗冻剂的出现，发展非常迅速，不断有小鼠、绵羊和非人类哺乳类动物卵巢组织冷冻实验研究报道，并有冻融卵巢组织移植成功的案例。绵羊与人类卵巢无论是卵巢组织结构及排卵周期均较为相似，因此绵羊卵巢组织冻融并移植后获得成功的妊娠，为人类卵巢组织冻融技术的发展和应用提供了有意l摘要义的模型，并奠定了坚实的实验基础。DonnezJ在腹腔镜下对一例何杰金氏患者自体原位移植了冻存6年的卵巢组织，随访发现该患者

7、术后半年就恢复了月经周期，并有周期性排卵及黄体生成，术后11个月HCG测定和B超证实患者成功妊娠，并顺利分娩。我国开展卵巢组织冷冻技术还处于摸索阶段，陈子江等研究冷冻人卵巢皮质，观察卵巢皮质内各级卵泡形态及卵巢组织体外培养获得了一定的经验。卵巢组织冷冻保存的优势在于其可冷冻卵巢皮质原位未成熟的始基卵泡，因其具有相对静止、体积小、缺乏透明带及皮质颗粒的特性，容易耐受冷冻及复苏造成的损伤，成功的卵巢组织冷冻和复苏，可保存卵巢组织中大量结构完整、具有生存活力及发育能力的原始卵泡，从而开辟了一条卵巢早衰和恶性肿瘤患者的治疗新途径。有效的卵巢冷冻保存及复苏技术

8、是建立卵子库的基本前提，复苏后卵巢组织的成功移植对女性生育力的保存及恢复具有重要意义。为了拯救面临威胁和濒危