姜黄素对胶质瘤细胞系u87的放疗增敏作用及其机制研究

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1、同等学力人员硕士学位论文论文题目姜黄素对胶质瘤细胞系U87的放疗增敏作用及其机制研究研究生姓名马建芬指导教师姓名夏春林(教授)专业名称人体解剖与组织胚胎学研究方向神经胶质细胞发生与分化及相关疾病论文提交日期2013年5月姜黄素对胶质瘤细胞系U87的放疗增敏作用及其机制研究中文摘要姜黄素对胶质瘤细胞系U87的放疗增敏作用及其机制研究中文摘要目的：研究姜黄素(Curcumin)与放疗单用或者联用对U87人脑胶质瘤细胞系的生长抑制效果、U87细胞的形态学的变化、以及对于细胞周期分布和特异蛋白的影响。根据所得结果分析姜黄素在体外放疗

2、增敏作用，其剂量与效应关系、时间与效应关系、效应分子变化特征等。方法：不同浓度姜黄素作用于人脑胶质瘤U87细胞24h后，改良MTT法（CCK-8）检测姜黄素药物毒性；姜黄素与放疗单用和联用后，通过克隆形成实验（clone-formingassay）观察姜黄素对U87细胞放射敏感性的影响，采用TUNEL法检测各组胶质瘤细胞的凋亡细胞；以流式细胞仪检测各组胶质瘤细胞的细胞周期分布（细胞处于G1、S、G2的比率）。采用westernblotting测定姜黄素对双特异性磷酸酶-2（DUSP-2）、JNK及ERK等表达水平的影响。结果

3、：姜黄素对人胶质瘤U87细胞具有明显的抑制作用，可导致细胞凋亡，其效应呈现明显的时间和剂量依赖。选择对胶质瘤U87细胞影响较小的剂量（5mol/L、10mol/L）即可显著降低放射后U87细胞的克隆形成率，其放射增敏比为1.71和4.65；流式细胞术检测发现，姜黄素可将U87细胞阻滞在放射敏感时相G2/M期。应用westernblotting测定发现，姜黄素可引起DUSP-2的表达上调，而抑制下游ERK和JNK的表达。结论：低剂量的姜黄素对人胶质瘤U87细胞有放射增敏作用，其机制可能是，姜黄素引起DUSP-2表达水平提高

4、，同时调控下游通路中ERK和JNK表达，继而导致细胞G2/M期阻滞，从而增强放疗敏感性。关键词：神经胶质瘤；姜黄素；放疗增敏；双特异性磷酸酶-2；细胞系作者：马建芬指导老师：夏春林I英文摘要姜黄素对胶质瘤细胞系U87的放疗增敏作用及其机制研究TheradiosensitizingeffectofCurcumininU87gliomacellsanditsmechanismAbstrctObjective:ToobserveandstudytheinhibitoryeffectongrowthofU87gliomacellso

5、fCurcuminassociatedwithradiotherapyoruseoneofthemseparately,morphologicalchangesofgroupsofU87cells,thecellcycledistributionandimpactofspecificprotein.Accordingtotheaboveresults,todeterminethemechanismofCurcuminradiosensitizingeffectinvitro,thedose-responserelations

6、hip,time-effectrelationship,andthevariationcharacteristicofeffectormolecules.Methods:ThehumangliomaU87celllinewastreatedwithCurcuminofdifferentconcentrationsfor24h.ModifiedMTTassay（CCK-8）wasusedtoevaluatethecytotoxiceffectsofCurcuminonU87cellsandclonogenicassaywase

7、mployedtoobservetheeffectsontheradiosensitivityoftheU87quantifiedbycalculatingthesensitiveenhancementratio(SER).TheflowcytometrywasutilizedtoobservetheapoptosisofU87cellsinducedbyCurcuminandthecellcycleofU87cellsinresponsetoX-rayirradiation.Usingwesternblottingtode

8、terminetheeffectsofCurcuminonDUSP-2,JNK,ERKproteinexpression.Results:TheCurcumincouldsignificantlyinhibittheproliferationofU87cells,withobviousdo