姜黄素对活性氧所致精子dna损伤的保护作用

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1、湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：囊培警≯以年§月弓口日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅

2、和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部份内容，可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。同意《中国优秀博硕士论文全文数据库出版章程》的内容。同意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密论文在解密后遵守此规定)黼槲：璐删名彻字础㈨口日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．I英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．V英文缩略词⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯X前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．．1刖吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．．上论文正文第一章：研究姜黄素对次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶所致人精子DNA损伤的保护作用1．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．4结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．111．5讨论⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．6小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17第二章：研究姜黄素对环磷酰胺所致小鼠精子DNA损伤的保护作用2．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．282．3讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．332．4小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．36结语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．37思考与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．38参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45综述一⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．58攻读学位期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．60致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61中文摘要第一章：姜黄素对次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶所致人精子DNA损伤的保护作用目的探讨活性氧对精子DNA损伤的机制，研究姜黄素对活性

5、氧(reactiveoxygenspecies，ROS)所致精子DNA损伤的保护作用，以期寻找一种安全有效的防治精子DNA损伤的药物。方法应用体外培养的方法，经密度梯度离心法优选后的精子作为正常精子模型，采用次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶(H)(一XO)体系产生活性氧(ROS)，然后在有氧环境下，将不同浓度的姜黄素与之共同孵育后，通过酶联免疫吸附法(ELISA法)测定精子悬液中ROS含量，采用精子计算机辅助分析法(Computer—aidedspermanalysis，CASA)检测精子活动率，Diff-Quik染色法进行精子形态分析，

6、通过精子尾部低渗膨胀试验评估精子膜功能，通过吖啶橙荧光染色测定精子DNA损伤程度，并与已知的抗氧化剂VitC对照。结果姜黄素低、中、高剂量(1、10、100ug／m1)在相同的条件下均可降低精子悬液活性氧(ROS)含量，显示对ROS所致精子DNA的氧化损伤均具有不同程度的预防作用，对精子膜功能及其精子DNA具有一定的保护作用。姜黄素对精子DNA的保护作用呈双向性，中剂量(10ug／m1)时作用最显著。结论1．在精子体外培养时，培养液中添加适当的抗氧化物在避免精子活力下降和抑制精子膜过氧化损伤方面具有一定作用。2．姜黄素对活性氧所

7、致人精子DNA具有明显的保护作用，其作用机制与降低ROS含量、抗脂质过氧化物产生有关。3．当姜黄素的浓度达到一定浓度时，可从抗氧化剂转换成促氧化作用。关键词姜黄素(cur)；活性氧(ROS)；精子DNA；第二章：研究姜黄素对环磷酰胺所致小鼠精子DNA损伤的保护作用目的探讨环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)对精子DNA损伤的机制，研究姜黄素对CTX所致精子DNA损伤的保护作用，以期寻找一种安全有效的防治精子DNA损伤的药物。方法选用清洁级昆明雄性小鼠随机分为6组，其中对照组小鼠每天给予维生素C50mg／kg．d灌

8、胃；姜黄素低、中、高组小鼠每天给予姜黄素混悬液lOOmg／kg、150mg／kg、200mg／kg灌胃；正常组小鼠及Omg／kgCur组予等量的0．5％羧甲基纤维素钠溶液灌胃，各组均连续处理28天，给药的同时除了正常组外其余各组均按照40mg／kg．d腹腔注射环