桃仁多肽的酶法制备及其抗氧化活性分析

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1、桃仁多肽的酶法制备及其抗氧化活性分析杨玉蓉1李安平1,*钟政昌2李刚1（中南林业科技大学食品科学与工程学院1，长沙410004）（西藏农牧学院食品科学学院2，林芝860000））摘要：以桃仁蛋白为原料，对响应面法优化多肽制备条件和酶解多肽各组分的抗氧化活性进行了研究。结果表明：以底物浓度3.5%、pH10.4、加酶量4200U/g、酶解时间4.9h条件下进行碱性蛋白酶酶解，可获得桃仁蛋白的最高水解度（61.12±0.7）%和多肽得率（67.91±0.5）%。桃仁蛋白及其酶解物的SDS-PAGE凝胶电泳图表明，酶解后的多肽分子质量大部分小于12000u。酶解液

2、（PPH）及其超滤分离所得4组分分别采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、亚硝酸根离子清除能力和总抗氧化能力等4个体外抗氧化活性测试，结果显示不同分子质量组分间的抗氧化活性存在显著性差异（P﹤0.05），分子质量越小，其抗氧活性越强。RP-HPLC分析表明，抗氧化活性最强的P-IV组主要由9种具有一定疏水性的多肽组成。关键词：桃仁多肽酶解抗氧化活性SDS-PAGE反相高效液相色谱中图分类号：TS209文献标志码：A文章编号：PreparationofPeptidesfromPeachKernelProteinbyEnzymolysisandIt

3、sAntioxidantCapacityinvitroYangYurong1LIAnping1*ZhongZhengchang2LiGang1(CollegeofFoodScienceandEngineering,CentralSouthUniversityofForestryandTechnology1.Changsha410004)(CollegeofFoodScience,XizangAgricultureandAnimalHusbandryCollege2.Linzhi860000)Abstract:Thestudyaimstooptimizethe

4、enzymatichydrolysisconditionanddetectinvitroantioxidantcapacitiesofhydrolyticPeachkernelpeptides.Thedegreeofhydrolysis(DH)andextractionrateofpeptide,asresponses,wereoptimizedbyusingResponseSurfaceMethodology(RSM).Theoptimizationresultsweresubstrateconcentrationof3.5%,pHvalue10.4,en

5、zymedosage4200U/gandhydrolysistimeof4.9h.Underthisoptimumcondition,theDHandextractionrateofpeptidewere(61.12±0.7)%and(67.91±0.5)%,respectively.TheSDS-PAGEanalysisshowedthatthemolecularweightofpeachkernelhydrolyticpeptideswasunder12000u.4componentswithdifferentmolecularweightweresep

6、aratedfrompeachkernelproteinhydrolysate(PPH)byultra-filtration.ThescavengingcapacitiesofDPPHradical,ABTSradicalandnitriteaswellastotalantioxidantcapacitytestwereadoptedtoevaluatetheantioxidantcapacityof4componentsandPPH.Resultssuggestedthattherewasasignificantdifferenceinantioxidan

7、tcapacitybetweendifferentmolecularweightcomponents(P﹤0.05).Thesmallerthemolecularweight,thestrongertheantioxidantactivityis.Finally,thehighestantioxidantcapacitypeptideP-IV(﹤3000u)wasanalyzedbyReversedPhaseHighPerformanceLiquidChromatography(RP-HPLC).TheReversedPhaseHighPerformance

8、LiquidChromatogramofP-IVin