不同氨基酸模式及来源对大黄鱼(larimichthys crocea)稚鱼生长、存活、消化酶活力及蛋白质代谢的影响

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1、谨以此论文献给我的家人、导师和朋友们---------------李文杰2013年3月不同氨基酸模式及来源对大黄鱼(Larimichthyscrocea)稚鱼生长、存活、消化酶活力及蛋白质代谢的影响摘要本文以我国南方重要的海水养殖鱼类大黄鱼（Larimichthyscrocea）稚鱼为研究对象，在室内养殖系统中进行30d的养殖实验，每实验桶5000尾稚鱼，每天投喂5次，-1饱食投喂。实验期间，水温23-25℃，盐度22-26，pH7.8-8.2，溶氧量在6mgL以上，-1换水量为200-300%d。主要研究内容及结果如下：1、以初始体重3.15±0.15mg的大黄

2、鱼稚鱼（15日龄）为实验对象，研究不同氨基酸模式对大黄鱼稚鱼生长、存活、消化酶及代谢酶活力的影响。以全鱼粉组为对照组，其他处理组分别添加30%白鱼粉和20%晶体氨基酸混合物。其中，晶体氨基酸的添加分别按照大黄鱼鱼卵、稚鱼鱼体、成鱼肌肉及实验所用低温白鱼粉（产自秘鲁）中氨基酸组成比例，配制出四种不同氨基酸模式的等氮等脂实验饲料（分别命名为FEAA、LBAA、AMAA和FMAA）。实验结果表明，鱼粉氨基酸模式处理组（FMAA）稚鱼的特定生长率（SGR）最高，显著高于鱼卵氨基酸模式处理组（FEAA）和稚鱼鱼体氨基酸模式处理组（LBAA）（P<0.05），但与全鱼粉组（对

3、照组）和成鱼肌肉氨基酸模式组（AMAA）差异不显著（P>0.05）。仔稚鱼存活率（SR）在四种氨基酸模式中差异不显著（P>0.05），由高到低顺序为FMAA>LBAA>AMAA>FEAA。全鱼体成分分析结果表明，FMAA处理组粗蛋白含量最高，显著高于FEAA和AMAA处理组（P<0.05），但与LBAA和对照组差异不显著（P>0.05），均显著低于生物饵料组（P<0.05）；四种氨基酸模式对鱼体粗脂肪和水分含量影响差异不显著（P>0.05）。消化酶分析结果表明，FMAA组胰蛋白酶活力、肠段胰蛋白酶活力与胰段胰蛋白酶活力的比值（Trypsin(I)/Trypsin(

4、P)）、碱性磷酸酶活力及亮氨酸氨肽酶活力均显著高于FEAA和LBAA组（P<0.05）。代谢酶分析结果表明，FMAA处理组谷丙转氨酶活力和谷草转氨酶活力均显著高于另外三种氨基酸模式组（P<0.05）。综上结果，本实验条件下，相对于鱼卵氨基酸模式、稚鱼鱼体氨基酸模式和成鱼肌肉氨基酸模式，鱼粉氨基酸模式最能促进大黄鱼仔稚鱼的生长，因此，建议在配制大黄鱼仔稚鱼饲料时，其氨基酸的组成以鱼粉氨基酸组成为参照。2、以初始体重3.15±0.15mg的大黄鱼稚鱼（15日龄）为实验对象，研究不同氨基酸源对大黄鱼稚鱼生长、存活、消化酶及代谢酶活力的影响。以全鱼粉组为对照组，其I他处理

5、组分别以不同肽段水解鱼蛋白（低分子量肽段、未分离水解蛋白和高分子量肽段）替代40%鱼粉，配制出三种不同氨基酸源的等氮等脂实验饲料。实验结果表明，低分子量水解蛋白组稚鱼存活率（SR）显著高于未分离水解蛋白组（P<0.05），但与高分子量水解蛋白组和全鱼粉组差异不显著（P>0.05），生物饵料组SR显著高于各饲料处理组（P<0.05）。低分子量肽段组稚鱼特定生长率（SGR）显著高于高分子量肽段组（P<0.05），但与生物饵料组及其他处理组无显著差异（P>0.05），由高到低的顺序为：生物饵料组>全鱼粉组>低分子量肽段组>未分离水解蛋白组>高分子量肽段组。全鱼体成分分析

6、结果表明，各饲料处理组之间稚鱼鱼体粗蛋白、粗脂肪及水分含量差异不显著（P>0.05）。消化酶分析结果表明，低分子量肽段组的稚鱼胰蛋白酶活力、肠段胰蛋白酶活力与胰段胰蛋白酶活力的比值（Trypsin(I)/Trypsin(P)）、碱性磷酸酶活力及亮氨酸氨肽酶活力均显著高于未分离水解蛋白组和高分子量肽段组（P<0.05）。代谢酶分析结果表明，低分子量肽段组谷丙转氨酶活力和谷草转氨酶活力均最高，且显著高于其他处理组和生物饵料组（P<0.05）。综上结果，不同分子量的水解鱼蛋白替代40%鱼粉时显著影响了大黄鱼稚鱼生长和存活，水解蛋白中某些低分子量的物质（小肽等）有利于稚鱼

7、的生长及存活。3、大黄鱼小肽转运载体PepT1基因的克隆及不同氨基酸源对大黄鱼稚鱼肠段PepT1mRNA表达量的影响。利用同源性克隆及3’RACE，5’RACE技术克隆得到大黄鱼PepT1cDNA的全长，包括2923个核苷酸，其中开放阅读框包括2181个核苷酸，编码一个由726个氨基酸残基组成的蛋白质，氨基酸序列比对发现与其他脊椎动物具有较高同源性。该序列中有PepT1的典型结构特征：两个PTR2寡肽转运蛋白信号，十二个膜电位跨膜域，且在第九跨膜区，存在一个高度保守的胞内cAMP/cGMP依赖型蛋白激酶磷酸化位364点（Thr）。荧光实时定量PCR法分析了不同肽段

8、水解鱼蛋白