尼古丁对raw264.7和el4细胞增殖及凋亡作用的研究

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3、，默认为公开学位论文，均适用上述授权。)声明人(签名)：参I确摘要缩略语索引缩略语英文全名中文全名a7nAChRa7acetylcholinereceptors值7乙酰胆碱受体BTXa-bungarotoxin银环蛇毒素TCtubocurarinechloride氯化筒箭毒碱Ninicotine尼古丁MAPKmitogen·activatedproteinkinase丝裂原活化蛋白激酶FBSfetalbovineserum胎牛血清FCMflowcytometry流式细胞术Erkl／2extracellularsignal—regulatedkinasel／2细胞外信号调节蛋白激酶Str

4、ess--activatedproteinkinase／c-JunN--terminal应激活化蛋白激酶／c—Jun氨SAPK／JNKkinase基末端激酶DDPCisplatin顺式二氨基二氯络铂PCNAproliferatingcellnuclearantigen增殖细胞核抗原MOMPmitochondrialouter-membranepermeabilization线粒体外膜透化PTpermeabilitytransition线粒体膜通透性转运孔Caspase-3Cysteinlyaspartatespecificprotease一3半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋TEMEDN，N，N

5、’，N'-Tetramethylethylenediamine四甲基乙二胺BSABovineSerumalbumin小牛血清白蛋白PlPromideiodine碘化丙啶TrisTrihydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基甲烷ArcAcrylamide丙烯酰胺SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基磺酸钠TBSTrisBufieredSalineTris缓冲液PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液EDTAEthylenediaminetraceticacid乙二胺四乙酸DDPcisplatin顺铂SDSSodiumdodec

6、ylsulfate十二烷基磺酸钠PCDprogrammedcelldeath细胞程序化死亡半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋Caspase-9Cysteinlyaspartatespecificprotease一9白酶家族一9FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素P13Kphosphoinositide3-kinase磷脂酰肌醇3．激酶APCAllophycocyanin别藻青蛋白摘要尼古丁作为伐7乙酰胆碱受体激动剂能够有效调节细胞增殖和活性。近期，Gergalova等研究发现，0【7烟碱型乙酰胆碱受体不仅表达在细胞质膜上调控细胞的增殖和存活，同时也在线粒体外膜

7、上调节细胞色素C(CytC)释放。而细胞色素C的释放作为凋亡信号传导的重要因素，是目前研究的热点。各种凋亡刺激信号通过BH3(Bcl-2homologydomain3)-only蛋白引起Bax(Bcl-2-asslciatedproteinx)蛋白转位到线粒体外膜上并多聚化，形成膜通道，刺激线粒体释放细胞色素C，从而引起细胞凋亡。本课题采用Raw264．7和EL4细胞系分别探究尼古丁刺激对其增殖能力和生存活性的影响。首先以CCK．8细胞增殖实验