大鼠正中隆起nestin,sox2和brdu阳性细胞的分布及形态学研究

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1、一虢老发聊签穆毒印二一一甍鲮兰f厶f多年；月％日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：龙善＼一章：鸟喜甲导师签章：。／／l，f渺哆年多眵‘日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7研究论文大鼠正中隆起Nestin，Sox2和BrdU阳性细胞的分布及形态学研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8刖吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯舀材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯．35结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．37参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．38综述正中隆起伸长细胞的屏障功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．40致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．53个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54中文摘要大鼠正中隆起Nestin，Sox2和BrdU阳性细胞的分布及形态学研究摘要目的：观察正中隆起的Nestin，Sox2，BudU阳性细胞的分布及形态。方法：选择健康S

4、D大鼠30只，体重180．2009，随机分成两组：①正常组(n=15)；②模型组(n=15)：注射BrdU。1BrdU标记实验动物模型制备：分别于16：00和18：00，按照50mg／kg剂量对模型组的实验动物进行腹腔注射BrdU生理盐水溶液，连续给药三天，制备BrdU模型。2取材和标本制备：正常组实验动物9只，常规麻醉，经心灌注，取材，后固定，浸蜡包埋，选取含正中隆起部分，石蜡切片，厚度为5pm，分别经甲苯胺蓝染色、Nestin和Sox2免疫组织化学染色；BrdU模型实验动物9只，常规麻醉，经心灌注，

5、取材，固定，浸蜡包埋，选取含正中隆起部分，石蜡切片，厚度为5pm，进行BrdU免疫组织化学染色，封片后OlympusBX．UCB显微照相系统观察照像。3Nestin，Sox2免疫荧光化学双标染色步骤：正常组实验动物6只，常规麻醉，经心灌注，取材，后固定，蔗糖浸泡后选取含正中隆起部分，冰冻切片，厚度为8肛m，经Nestin，Sox2免疫荧光化学双标染色，50％甘油封片后OlympusBX．UCB显微照相系统观察照像。4BrdU，Sox2免疫荧光化学双标染色：BrdU模型动物6只，常规麻醉，经心灌注，取材，

6、后固定，蔗糖浸泡后选取含正中隆起部分，冰冻切片，厚度为8pm，经BrdU，Sox2免疫荧光化学双标染色，50％甘油封片后OlympusBX．UCB显微照相系统观察照像。5统计学处理：照片的阳性细胞采用专业图像分析软件Image．ProPlus6．0对阳性细胞和总细胞进行计数，计算阳性率。结果：1甲苯胺蓝染色正常组大鼠下丘脑的冠状切片显示正中隆起位于第三脑室的基底部。甲苯胺蓝染色后，细胞核呈蓝色，尼氏体呈蓝紫色，正中隆起被分为五个中文摘要层次：室管膜层、室管膜下层、纤维层、网状层和栅状层。正中隆起及第三脑

7、室侧壁的室管膜细胞分为四种不同形态。正中隆起的腹侧被腺垂体结节部覆盖，ME含有大量毛细血管。2免疫组织化学染色2．3Nestin染色：ME中央部2／3的室管膜层和室管膜下层，胞核较大，胞质为Nestin强阳性；ME两侧的室管膜层和室管膜下层，胞核较小，胞质为Nestin弱阳性；ME纤维层和网状层有散在分布的粗大Nestin阳性突起，Nestin阳性细胞胞核较大，散在分布；在栅状层偶见Nestin阳性细胞，胞核较大。第三脑室单侧侧壁Nestin阳性细胞表达率：6．01+5．30％。ME的Nestin阳性细

8、胞表达率：42．45+3．42％。2．2Sox2染色：ME室管膜层和室管膜下层的Sox2免疫阳性细胞紧密排列，ME纤维层和网状层，Sox2阳性细胞较稀疏。第三脑室单侧侧壁Sox2阳性细胞表达率：32．77+7．24％。ME的Sox2阳性细胞表达率：48．30+5．66％。2．3BrdU染色：BrdU阳性细胞在ME的纤维层和网状层零星分布，少数位于栅状层，偶见于室管膜下层。第三脑室单侧侧壁BrdU阳性细胞表达率：O．124-0．08％。ME的