不同年龄阶段大鼠正中隆起nestin和sox2阳性细胞的观察-(7429)

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1、万方数据研究论文不同年龄阶段大鼠正中隆起Nestin和Sox2阳性细胞的观察前言神经干细胞(neuralstemcell，NSC)，是指来源于中枢神经系统的多能干细胞，终身具有自我更新能力，并能分化成神经系统的各类细胞；在特定条件诱因下，能够向特定类型神经元或神经胶质细胞分化的特殊的未分化或低分化细胞的总称。其主要功能是作为一种细胞储备，参与神经系统损伤修复或细胞正常死亡的更新。神经干细胞在脑室管膜下区及海马终生存在，并随着年龄其增殖、分化和迁移呈现出逐渐降低的趋势。正中隆起(medianeminence，ME)是室周器官之一，位于第三脑室底部，介于视交

2、叉和垂体柄之问，向腹侧膨隆。通过鼠脑冠状切片观察，ME组织结构分为3层，由背侧向腹侧依次为室管膜带、内带和外带【t]。其位置特殊，功能复杂，包括参与脑脊液和血液间物质交换、分泌激素等，在神经内分泌、神经免疫调节方面及血压调节所起的作用日益受到人们的关注。SD大鼠是1925年SpragueDawley用Wistar大鼠培育而成。其性情较Wistar大鼠凶猛，比Wistar大鼠的适应性和抗病能力更强，已作为重要的实验大鼠品种，』一泛应用于药理、毒理、药效及GLP实验。Nestin：神经上皮干细胞蛋白(Neuroepithelialstemprotein)，又

3、称巢蛋白，属于第Ⅵ类神经元中间丝蛋白，分布在细胞质。在哺乳动物体内Nestin参与构成细胞骨架，起始于神经板的形成，随着神经细胞的迁移、分化，Nestin的表达量逐渐下降，当神经细胞分化完成后其表达转为阴性。神经干细胞体外培养实验发现，经免疫化学染色的Nestin阳性细胞可以分化为星形胶质细胞和神经元，提示Nestin可以作为干细胞的标记物[2】。目前作为神经干细胞的标记物被广泛应用于神经干细胞的检测鉴定。Sox2：胚胎干细胞特异性转录因子(ThesexdeterminingregionofYchromosome—relatedhighmobilityg

4、roupbox2)，作为Sox家族成员之一，它是一种含有Sry．relatedboxgenes(SRYbox)功能域(motif)的转录因子，在维持干细胞特性和多向分化潜能中起到关键性作用，能促进细胞的增殖和抑制细胞的分化，在细胞代谢活跃而分化能力较低的组织中万方数据研究论文表达阳性【3，4]。Sox2分布在细胞核，从胚胎期到成年后在中枢神经系统持续表达，抑制神经干细胞的分化【51。成年大鼠体外培养实验发现Sox2标记阳性的细胞，经过处理后可以增殖分化为神经球或神经胶质细胞，提示Sox2可以作为干细胞的标记物【6]。本实验以正常青年、成年雄性SD大鼠ME

5、作为观察对象，使用Nestin和Sox2免疫组化法染色，观察比较青年组和成年组大鼠ME处Nestin和Sox2Bfl性细胞的形态结构、分布的变化，探讨ME处是否存在NSCs，并比较二者的差别，为研究正中隆起处神经干细胞的增殖、分化以及功能意义提供形态学依据。1材料1．1实验动物雄性健康SD大鼠，验动物中心提供。1．2试剂蔗糖(分析纯)中性树胶材料与方法8周龄12只，24周龄12只，由河北医科大学实多聚甲醛(分析纯)二甲苯(分析纯)磷酸二氢钠(分析纯)甲酰胺(分析纯)水合氯醛柠檬酸钠(分析纯)医用石蜡油(分析纯)100％乙醇(分析纯)硼酸(分析纯)磷酸氢二

6、钠(分析纯)苏木色精氯化钠注射液上海试剂一厂上海标本模型厂天津市化学试剂研究所天津市永大化学试剂开发中心天津市永大化学试剂有限公司天津市光复精细化工研究所天津市红岩化学试剂厂天津市泰兴试剂厂天津市福宇精细化工有限公司天津博迪化工股份有限公司中国医药公司石家庄四药有限公司万方数据研究论文盐酸(分析纯)石家庄市华迪化工工贸有限公司95％乙醇石家庄新宇三阳实业有限公司100％乙醇(分析纯)天津市福宇精细化工有限公司TritonX．100一北京solarbio公司3％过氧化氢北京中杉金桥公司DAB显色试剂盒北京中杉金桥公司山羊超敏二步法免疫组化检测试剂北京中杉金

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