花生四烯酸高产菌株特性研究

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1、分类号学号M201171494学校代码10487密级硕士学位论文花生四烯酸高产菌株特性研究学位申请人：宁凡学科专业：微生物学指导教师：周蓬蓬副教授答辩日期：2014年1月21日万方数据AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceCharacteristicAnalysisofHigh-YieldingArachidonicAcidStrainsCandidate:FanNingMajo

2、r:MicrobiologySupervisor:AssociateProf.PengpengZhouHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei430074,P.R.ChinaJan,2014万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完

3、全意识到,本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日

4、万方数据华中科技大学硕士学位论文摘要微生物菌种在发酵工业中至关重要，也有“发酵工业的灵魂”之称，因此，加强高产菌种的特性研究十分重要。高山被孢霉（Mortierellaalpina，MA）被广泛应用于工业化生产具有重要生理活性的花生四烯酸（Arachidonicacid，AA）。本文围绕花生四烯酸产生菌-高山被孢霉进行研究，全面比较AA含量不同的几株产生菌的特点，从而发现花生四烯酸高产菌株的显著特点，以期为进一步选育获得新的高产菌株、优化发酵工艺，以及确定高产菌株保藏方法等方面提供全面的指导。通过比较研

5、究，获得主要研究结果如下：（1）分离筛选了4株AA含量明显不同的高山被孢霉菌株M30、M32、M44、M45。在相同培养条件下，4株菌的AA含量差别明显分别为51%、41%、36%、16%，为比较分析AA高产菌株的特性提供了良好的实验材料。（2）比较分析了不同AA含量菌株的生长特性，发现AA高产菌株具有如下特点：相对AA产量低的菌株而言，AA高产菌株的单孢株在固体培养中生长速度平缓并生成大量孢子，液体发酵时AA高产菌株对葡萄糖转化率高、需求量相对较低。（3）比较分析了不同AA含量菌株的油脂组分及含量，发

6、现4株菌所合成的油脂组分完全一致，但组分的含量各不相同，其中尤以油酸（Oleicacid,OA）和AA12含量的差别显著，且二者呈反比例关系。通过进一步分析4株菌的转化油酸所需的Δ12去饱和酶的基因表达量，发现AA含量低的菌株其Δ去饱和酶基因表达量也低。因12此，Δ去饱和酶基因高表达可能是AA高产菌株的优良特性。（4）比较分析了不同AA含量菌株发酵终点时基因组DNA的甲基化水平，结果发现，4株菌的AA含量虽差别较大但基因组DNA甲基化修饰水平基本一致。表明AA高产菌株与AA低产菌株之间的DNA甲基化修饰

7、水平并无显著不同。12关键词：高山被孢霉、花生四烯酸、生长及代谢特性、Δ去饱和酶、DNA甲基化I万方数据华中科技大学硕士学位论文AbstractMicroorganismplaysacriticalroleinfermentationindustry,soit’sveryimportanttoanalysisthecharacteristicsofhighyieldstrains.MortierellaalpinaiswidelyusedtoproduceArachidonicacid(AA)withs

8、pecialphysiologicalactivities.ThisstudyfocusesoncomparingcomprehensivelysomestrainsofMortierellaalpinathatdifferentinAAcontenttodiscoverthecharacteristicsofstrainshighyieldofAA,andthenprovidecomprehensiveguidanceforstrains