菌落总数不确定度评定方案.doc

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1、污水中菌落总数测定结果的不确定度评定1、引用标准依据GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》的方法。2、适用范围污水及生活饮用水中菌落总数的测定3、检测方法以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样，注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：10的稀释液；吸取1：10的稀释液1ml注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：100稀释液；按同法依次制成1：1000、1：10000的稀释液备用；用灭菌吸管取未稀释的水样和2～3个适宜稀释度的水样1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀释度作2个平皿。然后在平皿内注入45℃左右营养琼脂约15ml，立即旋摇

2、混匀，同时做营养琼脂空白对照；待琼脂凝固后，翻转平皿，置36±1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数；选择菌落数在30～300稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数作为检测结果。本次实验选取一个水样（已预试验），制备成1：10的稀释液，分别稀释13次，制备13管备用，每管均做两个平行，吸取另一管时需换枪头，测得的结果乘以稀释倍数后再进行分析。4、建立数学模式y=x5、不确定度来源分析水样菌落总数检验中不确定度的来源有：样品保存条件，包括保存温度和保存时间；试剂，如培养基等；培养条件，包括培养时间的允差和培养湿度的允差；取样，包括稀释体积和取样体积；测量重复性。样品中菌落总数测定的不确定度

3、主要取决于细菌分布的均匀性，表现为测量的重复性，其他诸多影响因素相对于测量重复性可忽略不计。因此本实验仅考虑测量重复性引起的标准不确定度。6、不确定度的评估3由于微生物测量结果分散性很大，其最大值与最小值之间可相差到1个数量级，因此不能直接利用测量数据做不确定度评估，而需要对数据做对数处理。实验编号平皿1平皿2Si²x1jlgx1jx2jlgx2j1153604.1864124604.09550.0041211603.064519803.29670.0270320403.309632203.50790.0196437603.575223203.36550.0220513203.

4、120612203.08640.0006621403.330410703.02940.0453767603.829928703.45790.0692828103.448742703.63040.01659124004.093497803.99030.00531057903.762742703.63040.00871115003.176161803.79100.18901212903.110614803.17030.00181352903.723546403.66650.0016　求和45.7315　45.71810.4109具体计算过程如下：（1）共测量13个样品，每个样品测量

5、两次。（2）对测量结果x1j和x2j取对数，分别得到lgx1j和lgx2j。（3）对每一试样结果分别计算其残差的平方和：（4）由样品的残差平方和，计算13个试样的合并样本标准差。得到（5）每个样品测量两次，故两次测量平均值的标准不确定度为（6）根据置信概率p=0.953和自由度v=13，由t分布表得到包含因子k=2.16。于是扩展不确定度为（1）以区间的形式表示（8）样品的取值范围为（9）换算到x坐标，得水样菌落总数含量x所在的区间为7、结果报告该水样菌落总数平均值为3291cfu/ml，p=0.95，v=13，其菌落总数范围在1761与6149之间。3