菌落总数测定结果不确定度评估报告

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1、废水菌落总数测定结果不确定度评估1.实验前准备1.1设备：恒温培养箱、无菌吸管10ml（具0.1ml刻度）、微量移液器、无菌锥形瓶、无菌培养皿1.2培养基及试剂：平板计数琼脂、无菌生理盐水1.3因浓缩苹果清汁中一般菌落不容易生长，故用废水作为样品检测。2.检测依据及步骤2.1依据：GB4789.2—2010《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》2.2步骤：定量吸取废水，制备成15份均匀的检测样品，每份样品做两个平行样。检样↓10倍系列稀释↓选择2～3个适宜稀释度的样品匀液，用移液器各取1ml分别加入无菌培养皿内↓↓每皿中加入15ml～20ml平板计数琼脂培养基，混

2、匀↓36±1℃培养48±2h↓计数↓报告3.不确定度来源分析检测步骤主要包括样品的吸取、稀释（移液器）、培养、计数、及结果修约等，由于结果发散性较大的特点，在本次实验中，我们只对样品吸取、重复测定结果的不确定度进行量化分析。第3页共3页3.1样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度urel（V）3.1.1吸管体积校准引入的标准不确定度u（V）在吸取样品的过程中均使用经检定合格的10ml刻度吸管，其允许误差为±0.05ml，故10ml吸管体积校准引起的不确定度按矩形分布（k=）为：u1（V）==0.029ml则样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定

3、度：urel（V）===0.0029ml3.2重复测定结果的标准不确定度菌落总数测定结果不确定度评定编号测定结果取lg值残差平方和X1X2lgX1lgX21110010003.04143.00003.020700.000862150012003.17613.07923.127640.004703150017003.17613.23043.203270.001484180016003.25533.20413.229700.001315110014003.04143.14613.093760.00548690010002.95423.00002.977120.001

4、057160016003.20413.20413.204120.000008120014003.07923.14613.112650.002249120010003.07923.00003.039590.0031310170016003.23043.20413.217280.0003511130012003.11393.07923.096560.0006012140013003.14613.11393.130040.0005213170018003.23043.25533.242860.0003114120015003.07923.17613.127640.00

5、47015100012003.00003.07923.039590.00313求和0.029853.2.1对测定结果X1、X2分别取对数，得到lgX1和lgX23.2.2每一个样品的残差(在重复性条件下得出n个观测结果Xk与n次独立观测结果的算术平均值的差)平方和：式中：—每一个样品测定结果的对数值；第3页共3页—每一个样品测定结果对数的平均值。3.2.3根据《JJF—1999测量不确定度评定》中4.3,计算15个样品的合并标准偏差：式中：m—测定样品总个数，本次实验共15个；n—对每个样品的独立测定次数，本次实验每个样品平行测定两次。将残差平方和、m、n的值代

6、入上式得15个样品的合并标准偏差：==0.04461每个样品测定两次，则两次重复测定平均值的标准不确定度为：式中：n—重复测定次数=0.031544.合成标准不确定度U（X）=0.03175.扩展不确定度U根据置信区间p=95％，自由度v=14，由t分布表得k≈2.13，则扩展不确定度为：U=2.13×0.0317=0.0675以区间形式表示15组样品所有结果的lg平均值为：lgX=3.1242，所以该样品菌落总数的lg值为3.1242±0.0675，即3.0567～3.1917之间，取反对数得样品稀释液中菌落总数分布于1100～1500之间。5.结果报告该样品

7、菌落总数测试结果可估算为（1100～1500）cfu/ml第3页共3页