补阳还五汤联合mscs移植对缺血再灌注大鼠模型血管新生中整合素αvβ3、fak表达的影响

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1、摘要摘要目的：观察补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞对大鼠脑缺血再灌注损伤(I/R)模型整合素αvβ3、FAK的表达及脑皮质区血管新生的影响。方法：1制备补阳还五汤：参照本课题组前期研究的制备方法和质量控制标准。2采用“线栓法”制备SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型；利用大鼠脑立体定位仪右侧侧脑室注射骨髓间充质干细胞制作干细胞干预模型组(移植组)，制备模型2小时后开始侧脑室注射1次；中药干预模型组（中药组），制备模型前3天开始给药，模型制备后10天给药结束，共13天；通过神经功能评分方法，比较假手术组、模型组、移植组、中药组、中药+干

2、细胞组(联合组)大鼠神经功能变化。3用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中整合素αvβ3、FAK的含量，比较各组ITGαvβ3和FAK的变化。4用免疫组化法测定各组模型缺血侧大脑皮质区ITGαvβ3、FAK及CD34的表达，分析ITGαvβ3、FAK及CD34阳性血管数量，比较微血管密度(MVD)变化。结果：1神经功能评分：各组大鼠在缺血1d后神经功能缺损评分达到最高；中药组、移植组、联合组与模型组比较，大鼠神经功能缺损评分降低，7天时有显著差异。2缺血侧大脑皮质区微血管密度：中药组、移植组、联合组与模型组比较微血管密度增

3、多，差异显著(P﹤0.05)；中药组、移植组与联合组比较，联合组差异显著(P﹤0.01)。3缺血侧大脑皮质区ITGαvβ3、FAK表达：中药组、移植组、联合组与模型组比较ITGαvβ3、FAK表达升高，差异显著(P﹤0.05)；中药组、移植组与联合组比较，联合组差异显著(P﹤0.01)。4血浆ITGαvβ3、FAK表达：中药组、移植组、联合组与模型组比较ITGαvβ3、FAK表达升高，差异显著(P﹤0.05，P﹤0.01)；联合组与中药组、移植组比较，差异显著﹙P﹤0.05﹚。结论：1补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植能够提

4、高脑缺血大鼠模型神经功能评分，缩小梗死体积，促进缺血脑组织的修复。2补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血的保护机制可能通过上调ITGαvβ3、FAK表达，形成信号传导通路，促使血管新生，改善脑循环，从而达到抗脑损伤作用。-1-补阳还五汤联合MSCs移植对缺血再灌注大鼠模型血管新生中整合素αvβ3、FAK表达的影响3补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植治疗脑缺血时作用靶点较多，除新生血管途径外，尚有其他途径抗脑缺血损伤。4采用密度梯度离心法能够去除骨髓中的绝大多数红细胞和血小板等，分离获取到纯度较高的骨髓间充质干细胞。5骨

5、髓间充质干细胞通过侧脑室直接注射，可减少其在迁移过程中存在的内在因素的影响，避开血脑屏障，且操作简便，死亡率低，有一定的实用性，在研究直接作用于脑组织的药物时，是一种理想的方法。关键词：补阳还五汤；骨髓间充质干细胞；脑缺血再灌注损伤；血管生成；整合素αvβ3；黏着斑激酶。-2-AbstractTheeffectofBuyanghuanwuDecoctionwithMSCstransplantationontheexpressionofITGαvβ3andFAKoncerebralischemiamousemodelandit

6、simpactonAngiogensisinthePalliumZoneLiuYing(InternalMedicineofTraditionalChineseMedicine)DirectedbyZhangYunkeAbstractObjective:ToobservetheeffectofBuyangHuanwuDecoctionwithbonemarrow-derivedmesenchymalstemcelltransplantationontheexpressionofIntegrinαvβ3,focaladhesi

7、onkinaseandnewvesselsinthecortexofcerebralischemiaandreperfusioninjuriesinSDrats.Method:PreparedtheBuyangHuanwuDecoction(Referringtothepreparationmethodoftheourteams'previousresearchandqualitycontrolstandard).SDratcerebralischemia-reperfusioninjurymodelwasestablish

8、edwithsutureembolimethod;PreparedthemodelgroupinjectedMSCsintotherightcerebroventricularspacewiththestereotaxicatlasoftheratbrain,givingtheMSCson